| 利用毕赤酵母系统表达重组人生长激素的研究 |
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| 引用本文： | 朱振洪,葛立军,刘文洪,赵伟春,万海同.利用毕赤酵母系统表达重组人生长激素的研究[J].生命科学研究,2009,13(1). |
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| 作者姓名： | 朱振洪 葛立军 刘文洪 赵伟春 万海同 |
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| 作者单位： | 浙江中医药大学生物工程学院,中国,浙江,杭州,310053 |
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| 摘 要： | 为了获得重组人生长激素在毕赤酵母中高表达的菌株,按毕赤酵母基因密码子偏爱性,人工合成hGH的全基因序列.该基因被克隆到穿梭质粒pPIC9K中,PEG1000介导转入毕赤酵母GS115细胞,通过G418筛选获得高拷贝转化子.在甲醇的诱导下.实现了hGH在毕赤酵母中的成功表达.通过发酵条件的优化.发酵上清中的表达量达1537 mg/L经过超滤和两步层析,重组蛋白的得率这35%,纯度为97%,相对分子质量测定表明重组蛋白的相对分子质量与理论值相近.N-端氨基酸测序证实hGH基因在毕赤酵母中获得正确的表达.
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| 关 键 词： | 重组人生长激素 毕赤酵母 表达 纯化 |
Expression and Purification of Recombinant Human Growth Hormone in Pichia pastoris |
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| ZHU Zhen-hong,GE Li-jun,LIU Wen-hong,ZHAO Wei-chun,WAN Hai-tong.Expression and Purification of Recombinant Human Growth Hormone in Pichia pastoris[J].Life Science Research,2009,13(1). |
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| Authors: | ZHU Zhen-hong GE Li-jun LIU Wen-hong ZHAO Wei-chun WAN Hai-tong |
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