重水标记法测定大鼠骨骼肌蛋白合成动力学相关参数

本研究旨在以重水(~2H_2O)为示踪剂,测定大鼠骨骼肌蛋白合成动力学相关参数。将20只Sprague Dawley(SD)大鼠以腹腔注射、日常饮水的形式标记~2H_2O,分别在首次标记后的第1、3、5、6和10周,各取4只大鼠心脏穿刺取血浆,分离股四头肌。提取骨骼肌蛋白和血浆游离氨基酸,用盐酸水解,衍生后用气相色谱-质谱仪(gas chromatography-mass spectrometry,GC-MS)检测骨骼肌蛋白2~H-丙氨酰基和血浆游离丙氨酸中~2H的丰度,计算骨骼肌蛋白的分数合成率、合成动力学方程。结果显示,骨骼肌蛋白的分数合成率为12.8%/周,合成动力学方程为f_t=0.158×(1-e~(-0.128t))。以上结果提示,重水标记法能有效测定骨骼肌蛋白的合成动力学参数,适用于长期标记实验。