枯草杆菌内切葡聚糖酶基因的克隆及表达 |
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引用本文: | 肖邡明, 张义正,.枯草杆菌内切葡聚糖酶基因的克隆及表达[J].生物工程学报,1996,12(Z1). |
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作者姓名: | 肖邡明 张义正 |
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作者单位: | 四川联合大学生物工程系分子生物学实验室; |
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摘 要: | 以质粒Puc18为载体,从枯草杆菌(Bacilussubtilis)DB104基因组中克隆到一个内切葡聚糖酶基因。限制酶切分析表明重组质粒中的插入片段为3.5kb,其中各含有一个EcoRI,HindⅢ和PvuⅡ位点。该插入片段含有一完整的内切葡聚糖酶基因,其自身启动子能被大肠杆菌转录系统所识别。当加入lacZα基因启动子的诱导物IPTG后,内切葡聚糖酶表达量提高2.8倍。加入0.5%葡萄糖能抑制该基因的表达。该基因在大肠杆菌DH5αF′中表达的内切葡聚糖酶分布为:胞外67.3%,胞间周质3.9%,胞内28.8%。Southern杂交证实了该插入片段来自供体菌B.SubtilisDB104。
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关 键 词: | 内切葡聚糖酶基因 枯草杆菌 基因克隆 基因表达 大肠杆菌 |
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