| 流感疫苗单向免疫扩散试验中抗血清制备新方法的研究 |
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| 引用本文： | 顾琴,李娟,徐康维,邵铭,廖国阳,李卫东,李长贵.流感疫苗单向免疫扩散试验中抗血清制备新方法的研究[J].微生物学免疫学进展,2011,39(4):8-12. |
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| 作者姓名： | 顾琴 李娟 徐康维 邵铭 廖国阳 李卫东 李长贵 |
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| 作者单位： | 1. 中国医学科学院医学生物学研究所,昆明,650118
2. 中国食品药品检定研究院,北京,100050 |
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| 基金项目： | 国家863计划项目,流感疫苗血凝素含量检测参考品及新方法的研究(项目编号:2010AA022909) |
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| 摘 要： | 流感疫苗血凝素含量检测方法为单向免疫扩散试验,其抗血清通常由WHO参比实验室提供,通过纯化病毒、蛋白酶切获得血凝素主要抗原片段,然后再免疫动物获得抗血清。该方法制备时间较长,是制约流感疫苗研发及检测的主要因素。以RT-PCR方法获取甲型H1N1流感病毒血凝素中主要抗原片段基因,构建重组质粒并在大肠杆菌中表达,表达产物经纯化、复性后,以蛋白电泳及免疫印迹方法进行了鉴定。以纯化蛋白免疫家兔,制备了相应的抗体,初步证明可用于常规的单向免疫扩散试验。以该法可以快速获得抗血清,尤其是在大流行流感疫苗的研发中,加快疫苗研发进程。
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| 关 键 词： | 流感病毒 血凝素 重组表达 单向免疫扩散试验 |
A new method for the preparation of anti-serum against influenza virus hemagglutinin for single radial immunodiffusion assay |
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| GU Qin,LI Juan,XU Kang-wei,et al..A new method for the preparation of anti-serum against influenza virus hemagglutinin for single radial immunodiffusion assay[J].Progress In Microbiology and Immunology,2011,39(4):8-12. |
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| Authors: | GU Qin LI Juan XU Kang-wei |
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| Institution: | GU Qin1,LI Juan2,XU Kang-wei2,et al.(1.Institute of Medical Biology,Chinese Academy of Medical Science,Kunming 650118,China,2.National Institutes for Food and Drug Control,Beijing 100050,China) |
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| Abstract: | Single Radial Immunodiffusion(SRID) is used for the determination of Hemagglutinin(HA) content in influenza vaccines.The standard antisera for SRID test are routinely provided by WHO collaborative laboratories.The traditional preparation method involves purification and cleavage of virus,further separating of HA fragments for immunization of animals.This whole process could take more than 3 months for completion,which delay the vaccine development in due course.In this study,the HA gene fragment was obtaine... |
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| Keywords: | Influenza virus Hemagglutinin(HA) Recombinant expression Single Radial Immunodiffusion(SRID) |
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