| 日本血吸虫凋亡基因Sjcaspase3的克隆、真核表达 及其功能分析 |
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| 引用本文： | 王涛,洪炀,韩宏晓,吕超,贾秉光,曹晓丹,韩倩,陆珂,李浩,傅志强,林矫矫.日本血吸虫凋亡基因Sjcaspase3的克隆、真核表达 及其功能分析[J].生物工程学报,2016,32(7):889-900. |
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| 作者姓名： | 王涛 洪炀 韩宏晓 吕超 贾秉光 曹晓丹 韩倩 陆珂 李浩 傅志强 林矫矫 |
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| 作者单位： | 中国农业科学院 上海兽医研究所 农业部动物寄生虫学重点开放实验室，上海 200241,中国农业科学院 上海兽医研究所 农业部动物寄生虫学重点开放实验室，上海 200241,中国农业科学院 上海兽医研究所 农业部动物寄生虫学重点开放实验室，上海 200241,中国农业科学院 上海兽医研究所 农业部动物寄生虫学重点开放实验室，上海 200241,中国农业科学院 上海兽医研究所 农业部动物寄生虫学重点开放实验室，上海 200241,中国农业科学院 上海兽医研究所 农业部动物寄生虫学重点开放实验室，上海 200241,中国农业科学院 上海兽医研究所 农业部动物寄生虫学重点开放实验室，上海 200241,中国农业科学院 上海兽医研究所 农业部动物寄生虫学重点开放实验室，上海 200241,中国农业科学院 上海兽医研究所 农业部动物寄生虫学重点开放实验室，上海 200241,中国农业科学院 上海兽医研究所 农业部动物寄生虫学重点开放实验室，上海 200241,中国农业科学院 上海兽医研究所 农业部动物寄生虫学重点开放实验室，上海 200241 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金 (Nos. 81271871, 31172315) 资助。 |
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| 摘 要： | 为深入研究日本血吸虫细胞凋亡机制。利用PCR技术扩增得到Sjcaspase3的全长序列,其ORF含900 bp,编码299个氨基酸,理论分子量为33 509.7 Da,理论等电点为6.39。Real-time PCR分析表明该基因在日本血吸虫生长发育的各个时期均有表达,其中21 d表达量最高,42 d雌虫表达量高于42 d雄虫。成功构建了p XJ40-FLAG-Sjcaspase3重组质粒并转染到Hela细胞内,荧光定量PCR和Western blotting分析表明Sjcaspase3成功在Hela细胞中表达。酶活分析提示重组Sjcaspase3具有切割特异性底物天冬氨酸-谷氨酸-缬氨酸-天冬氨酸(DEVD)的活性。流式细胞术检测了Sjcaspase3可诱导Hela细胞发生早期细胞凋亡。研究结果为深入探讨Sjcaspase3的生物学功能及日本血吸虫细胞凋亡机制奠定了基础。
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| 关 键 词： | 日本血吸虫，caspase3，细胞凋亡，酶活，细胞流式 |
| 收稿时间： | 2015/11/13 0:00:00 |
Cloning, eukaryotic expressing and function analysis of Schistosoma japonicum apoptosis gene Sjcaspase3 |
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| Tao Wang,Yang Hong,Hongxiao Han,Chao Lv,Bingguang Ji,Xiaodan Cao,Qian Han,Ke Lu,Hao Li,Zhiqiang Fu and Jiaojiao Lin.Cloning, eukaryotic expressing and function analysis of Schistosoma japonicum apoptosis gene Sjcaspase3[J].Chinese Journal of Biotechnology,2016,32(7):889-900. |
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| Authors: | Tao Wang Yang Hong Hongxiao Han Chao Lv Bingguang Ji Xiaodan Cao Qian Han Ke Lu Hao Li Zhiqiang Fu and Jiaojiao Lin |
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| Institution: | Key Laboratory of Animal Parasitology, Ministry of Agriculture, Shanghai Veterinary Research Institute, Chinese Academy of Agricultural Science, Shanghai 200241, China,Key Laboratory of Animal Parasitology, Ministry of Agriculture, Shanghai Veterinary Research Institute, Chinese Academy of Agricultural Science, Shanghai 200241, China,Key Laboratory of Animal Parasitology, Ministry of Agriculture, Shanghai Veterinary Research Institute, Chinese Academy of Agricultural Science, Shanghai 200241, China,Key Laboratory of Animal Parasitology, Ministry of Agriculture, Shanghai Veterinary Research Institute, Chinese Academy of Agricultural Science, Shanghai 200241, China,Key Laboratory of Animal Parasitology, Ministry of Agriculture, Shanghai Veterinary Research Institute, Chinese Academy of Agricultural Science, Shanghai 200241, China,Key Laboratory of Animal Parasitology, Ministry of Agriculture, Shanghai Veterinary Research Institute, Chinese Academy of Agricultural Science, Shanghai 200241, China,Key Laboratory of Animal Parasitology, Ministry of Agriculture, Shanghai Veterinary Research Institute, Chinese Academy of Agricultural Science, Shanghai 200241, China,Key Laboratory of Animal Parasitology, Ministry of Agriculture, Shanghai Veterinary Research Institute, Chinese Academy of Agricultural Science, Shanghai 200241, China,Key Laboratory of Animal Parasitology, Ministry of Agriculture, Shanghai Veterinary Research Institute, Chinese Academy of Agricultural Science, Shanghai 200241, China,Key Laboratory of Animal Parasitology, Ministry of Agriculture, Shanghai Veterinary Research Institute, Chinese Academy of Agricultural Science, Shanghai 200241, China and Key Laboratory of Animal Parasitology, Ministry of Agriculture, Shanghai Veterinary Research Institute, Chinese Academy of Agricultural Science, Shanghai 200241, China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Schistosoma japonicum caspase3 apoptosis enzyme activity flow cytometry |
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