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| 用于细胞核钙成像的新型钙指示剂的构建与鉴定 | |
| 作者姓名： | 齐特杨华乾 范雪新赵天 郭运波丁卫 叶海虹 |
| 基金项目： | 国家自然科学基金项目（No. 31270033）,北京市自然科学基金（No. 5132003）,北京市属高等学校高层次人才引进与培养计划项目（No.CIT&TCD20130339） |
| 摘 要： | 细胞核钙离子是基因转录等细胞核反应过程重要的调控因子.然而,细胞核内钙离子信号的调控机制尚不清楚.缺乏稳定的、敏感的细胞核钙指示剂,是导致其调控机制难以研究的重要原因之一.针对这一问题,设计了能够在细胞核内特异性表达的、具有核定位功能的钙指示剂.以基因编码钙指示剂（GECIs）家族成员GCaMP6为模板,首先融合了对钙离子不敏感的红色荧光蛋白tdTomato来对局部的钙信号进行量化,其次融合了核定位信号（NLS）,使GCaMP6能够特异定位于细胞核中.结果表明,NLS-GCaMP6-tdTomato能够在细胞核中有效发挥作用,并且在钙敏感性与动力学上,也与GCaMP6相当. 这一新型细胞核钙指示剂将为研究细胞核钙离子的功能及其调控机制提供新的方法与途径. |
| 关 键 词： | 细胞核钙离子 钙成像 基因编码钙指示剂 |
| 收稿时间： | 2015-04-09 |
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