| 应用旋转生物反应器培养小鼠胚胎干细胞的初步研究 |
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| 引用本文： | 魏国峰,张景华,李向东,曲鹏. 应用旋转生物反应器培养小鼠胚胎干细胞的初步研究[J]. 中国微生态学杂志, 2009, 21(6) |
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| 作者姓名： | 魏国峰 张景华 李向东 曲鹏 |
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| 作者单位： | 1. 大连医科大学附属第二医院,心内科,辽宁,大连,116021
2. 大连市甘井子区红旗地区医院,内科,辽宁,大连,116000 |
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| 摘 要： | 目的 应用旋转生物反应器(RCCS)和微载体培养体系尝试建立一种实现批量培养干细胞的新方法.方法 应用RCCS和微载体培养体系对小鼠胚胎干细胞(mESCs)进行体外培养扩增,定期收集细胞样品,镜下观察mESCs在RCCS生长的形态特征,并定量绘制细胞生长曲线,利用MATLAB软件计算细胞生长参数并对照平面培养体系,利用H&E染色、免疫荧光及RT-PCR技术对RCCS内培养的mESCs的细胞形态,未分化标志蛋白(SSEA-1)和标志基因(oct-4)的表达进行定性或半定量分析.结果 mESCs可在RCCS内以贴附于微载体表面的形式实现三维生长,其生长增殖状态良好,且伴随培养时间的延长,SSEA-1蛋白及oct-4 基因的表达水平逐渐降低.这表明RCCS内培养扩增的mESCs逐渐走向分化,该分化进程同步于平面对照培养体系.结论 RCCS可以为mESCs的体外规模化扩增培养提供良好的培养体系.
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| 关 键 词： | 胚胎干细胞 旋转生物反应器 细胞三维培养 |
Proliferation and differentiation of mouse embryonic stem cells in rotary cell culture system |
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| WEI Guo-feng,ZHANG Jing-hua,LI Xiang-dong,QU Peng. Proliferation and differentiation of mouse embryonic stem cells in rotary cell culture system[J]. Chinese Journal of Microecology, 2009, 21(6) |
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| Authors: | WEI Guo-feng ZHANG Jing-hua LI Xiang-dong QU Peng |
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