| RNAi靶向VP2基因抑制中蜂囊状幼虫病毒在中华蜜蜂幼虫体内复制研究 |
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| 引用本文： | 马跃宇,费东亮,郭亚茜,金宏凯,张溪研,马鸣潇. RNAi靶向VP2基因抑制中蜂囊状幼虫病毒在中华蜜蜂幼虫体内复制研究[J]. 病毒学报, 2019, 35(1): 96-102 |
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| 作者姓名： | 马跃宇 费东亮 郭亚茜 金宏凯 张溪研 马鸣潇 |
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| 作者单位： | 锦州医科大学生命科学研究院 锦州121000;锦州医科大学生命科学研究院 锦州121000;锦州医科大学生命科学研究院 锦州121000;锦州医科大学生命科学研究院 锦州121000;锦州医科大学生命科学研究院 锦州121000;锦州医科大学生命科学研究院 锦州121000 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金项目;题目;“辽宁特聘教授”项目 |
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| 摘 要： | 中蜂囊状幼虫病(Chinese sacbrood disease,CSBD)是造成中华蜜蜂患病死亡的主要原因之一,目前尚无有效的治疗方法。为了研究靶向中蜂囊状幼虫病毒(Chinese sacbrood virus,CSBV)结构蛋白VP2基因的siRNA介导的RNA干扰(RNA interference,RNAi)作用和其对CSBV在中华蜜蜂幼虫体内复制的影响,设计合成针对CSBV VP2基因的特异性siRNA,以100 nM的浓度与pEGFPN1-VP2-CSBV融合表达载体共同转染至293T细胞中,通过荧光显微镜和流式细胞仪观察和分析siRNA在体外对CSBV VP2基因表达的干扰效果。同时,将siRNA(1μg/μL)和1×10~7拷贝数的CSBV共同饲喂2日龄中华蜜蜂幼虫,检测幼虫体内CSBV拷贝数和幼虫存活率,研究siR-NA对中华蜜蜂幼虫体内CSBV复制的影响。荧光结果显示,在293T细胞中siRNA能抑制CSBV VP2蛋白的表达,并且通过流式细胞仪检测分析发现干扰效果接近40%。幼虫饲喂实验表明,饲喂siRNA组在各时间点幼虫体内CSBV拷贝数均低于CSBV对照组,且在摄入siRNA后感染CSBV的幼虫存活率明显上升,与CSBV组差异极显著(P<0.01)。通过本研究,证明了针对CSBV结构蛋白VP2基因的特异性siRNA能够介导产生RNAi,影响CSBV在中蜂体内的复制,为深入研究CSBV VP2基因的功能和研发抗CSBV生物制剂提供了理论基础。
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| 关 键 词： | 中蜂囊状幼虫病毒(CSBV) 结构蛋白基因VP2 RNA干扰 病毒复制 |
Inhibition of Chinese Sacbrood Virus Replication in Apis Cerana Larvae by RNAi Targeting VP2 |
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| MA Yueyu,FEI Dongliang,GUO Yaxi,JIN Hongkai,ZHANG Xiyan,MA Mingxiao. Inhibition of Chinese Sacbrood Virus Replication in Apis Cerana Larvae by RNAi Targeting VP2[J]. Chinese journal of virology, 2019, 35(1): 96-102 |
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| Authors: | MA Yueyu FEI Dongliang GUO Yaxi JIN Hongkai ZHANG Xiyan MA Mingxiao |
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| Affiliation: | (Life Sciences Research Institute,Jinzhou Medical University,Jinzhou 121000,China) |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Chinese sacbrood virus(CSBV) Structural protein VP2 gene RNA interference(RNAi) Virus replication |
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