α—淀粉酶成熟蛋白N—端氨基酸序列变化对蛋白分泌的影响 |
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引用本文: | 陈启民,刘淑红.α—淀粉酶成熟蛋白N—端氨基酸序列变化对蛋白分泌的影响[J].遗传学报,1998,25(3):278-285. |
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作者姓名: | 陈启民 刘淑红 |
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作者单位: | 南开大学生命科学学院 |
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摘 要: | 从地衣芽孢杆菌(B.licheniformis)构建的重组质粒pAmy413,经过定点诱变,在α-淀粉酶基因的271位引入G取代原来的A,构建成突变型质粒pAmy413C。成熟的α-淀粉酶氨基酸由+2Asn变为+3Asp,其产量是野生型的2.02-2.57倍;N-端氮基酸序列分析发现:信号肽酶I的切割位点前移了一个氨基酸,即AlaAla-+3Asp;二级结构分析发现:在自由能为-51.7kcal时,突变型与野生型的mRNA都形成14个环状结构,区别在于271位的G不再与211位的U配对,形成G突出;蛋白质二级结构分析发现:33-37氨基酸的转角结构减少了1个氨基酸,这个氦基酸参与形成α-螺旋;这些空间结构和荷电氮基酸的变化有利于蛋白质的分泌。
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关 键 词: | α-淀粉酶,定点诱变,pAmy413C,蛋白质分泌,结构分析 |
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