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抗Ⅰ型马立克氏病毒sorf2蛋白的多克隆抗体制备及其特异性鉴定
引用本文:崔宁,苏帅,李久庆,赵鹏,李延鹏,丁家波,崔治中.抗Ⅰ型马立克氏病毒sorf2蛋白的多克隆抗体制备及其特异性鉴定[J].微生物学报,2013,53(3):284-292.
作者姓名:崔宁  苏帅  李久庆  赵鹏  李延鹏  丁家波  崔治中
作者单位:1. 山东农业大学动物科技学院,泰安,271018
2. 滕州市畜牧兽医局,滕州,277500
3. 中国农业科学院北京畜牧兽医研究所,北京,100081
4. 中国兽医药品监察所,北京,100081
基金项目:国家自然科学基金(31072149)
摘    要:目的]制备高效价鼠和兔抗Ⅰ型马立克氏病毒(Marek's disease virus,MDV) sorf2蛋白的多克隆抗体并对其特异性进行鉴定.方法]以Ⅰ型MDV GX0101为模板,利用PCR扩增sorf2基因,分别克隆进原核表达载体pET-28a(+)和pET-32a(+)中,转化大肠杆菌BL21 (Rosetta),经异丙基硫代-β-D半乳糖苷(IPTG)诱导后进行融合蛋白的表达和纯化.用纯化的融合目的蛋白常规免疫6-8周龄Balb/c小鼠和成年新西兰大白兔,制备抗sorf2蛋白的多克隆抗体.用Western blot和间接免疫荧光试验鉴定多克隆抗体的特异性.结果]Ⅰ型MDV的sorf2基因在原核表达载体中能够正确表达,免疫小鼠和兔后能获得与sorf2蛋白发生特异性反应的高效价的多克隆抗体.结论]制备的抗sorf2蛋白的多克隆抗体能够特异的鉴定MDV sorf2基因缺失株,有效的区分MDV疫苗株HVT(FC-126)与Ⅰ型MDV毒株,用于临床MDV野毒的分离鉴定.

关 键 词:Ⅰ型马立克氏病毒  sorf2基因  多克隆抗体  Western  blot  间接免疫荧光
收稿时间:2012/9/24 0:00:00
修稿时间:2012/11/9 0:00:00

Preparation and identification of polyclonal antibody to serotype Ⅰ Marek's disease virus sorf2 protein
Ning Cui,Shuai Su,Jiuqing Li,Peng Zhao,Yanpeng Li,Jiabo Ding and Zhizhong Cui.Preparation and identification of polyclonal antibody to serotype Ⅰ Marek's disease virus sorf2 protein[J].Acta Microbiologica Sinica,2013,53(3):284-292.
Authors:Ning Cui  Shuai Su  Jiuqing Li  Peng Zhao  Yanpeng Li  Jiabo Ding and Zhizhong Cui
Abstract:
Keywords:
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