| 木聚糖酶XYNB分子中折叠股B1和B2间的疏水作用对酶热稳定性的影响 |
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| 作者姓名： | 杨浩萌 姚斌 罗会颖 张王照 王亚茹 袁铁铮 柏映国 伍宁丰 范云六 |
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| 作者单位： | 1. 中国农业科学院饲料研究所,北京,100081
2. 中国农业科学院生物技术研究所,北京,100081 |
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| 基金项目： | 国家高技术研究与发展计划 (863计划 )项目 (No .2 0 0 3AA2 14 0 3 0 )，国际科技合作重点项目 (No.2 0 0 4DFA0 680 0 )资助~~ |
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| 摘 要： | 对来源于Streptomycesolivaceoviridis的高比活木聚糖酶XYNB进行同源建模,并结合嗜热木聚糖酶氮末端芳香族氨基酸疏水作用的结构分析,设计了XYNB的T11Y定点突变,观察XYNB分子中折叠股B1和B2的疏水作用对酶的热稳定性的影响。将突变酶XYNB′在毕赤酵母中表达,表达的XYNB′经纯化后与原酶XYNB(同样经毕赤酵母表达后纯化)进行酶学性质比较,结果表明,XYNB′的耐热性比XYNB有明显的提高,但最适温度与原酶一样为60℃。另外,XYNB′的最适pH、Km值及比活性均有一定的改变。实验证实了木聚糖酶XYNB的氮端芳香族氨基酸之间的疏水相互作用与其热稳定性相关,为进一步的结构与功能研究提供了优良的基因材料。
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| 关 键 词： | 木聚糖酶XYNB 定点突变 热稳定性 |
| 文章编号： | 1000-3061(2005)03-0414-06 |
| 修稿时间： | 2004-12-07 |
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