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棉铃虫Polycalin基因的克隆及其表达分析
引用本文:王亚楠,钟丰,魏纪珍,谢丙堂,张万娜,陈利珍,梁革梅.棉铃虫Polycalin基因的克隆及其表达分析[J].昆虫知识,2015(3).
作者姓名:王亚楠  钟丰  魏纪珍  谢丙堂  张万娜  陈利珍  梁革梅
作者单位:1. 华中农业大学植物科学技术学院,武汉 430070; 中国农业科学院植物保护研究所,植物病虫害生物学国家重点实验室,北京 100193
2. 华中农业大学植物科学技术学院,武汉,430070
3. 中国农业科学院植物保护研究所,植物病虫害生物学国家重点实验室,北京 100193
基金项目:Supported projects国家转基因生物新品种培育重大专项课题(2014ZX08011-007)**
摘    要:【目的】通过对棉铃虫Polycalin基因的克隆及其表达谱分析,进一步明确Polycalin基因在抗性中发挥的作用,为棉铃虫Helicoverpa armigera的抗性治理提供理论依据。【方法】通过RACE结合PCR技术克隆获得了棉铃虫Polycalin基因的全长序列,利用实时荧光定量PCR技术测定了在棉铃虫不同发育时期、幼虫肠道不同部位的Polycalin基因表达量,比较了棉铃虫取食含Cry1Ac蛋白的饲料后,Polycalin基因表达量的变化。【结果】该基因全长序列为2 955 bp,开放阅读框为2 781 bp,编码926个氨基酸(Gen Bank登录号为KP100652);预测蛋白的分子量为101.68 ku,等电点为4.57。推导的氨基酸序列中,N末端含有20个氨基酸组成的信号肽,含有8个O-糖基化位点,3个N-糖基化位点,C末端存在2个GPI结合位点。Polycalin在棉铃虫所有发育阶段都可以表达,幼虫期表达量较高,尤其在1~3龄幼虫体内表达量最高,在卵、成虫和蛹中的表达量较低。棉铃虫4龄幼虫取食含活化Cry1Ac蛋白的人工饲料后,Polycalin基因的表达受到抑制。【结论】研究结果可以为进一步揭示Polycalin基因的功能及其在Bt杀虫机制中的作用奠定基础。

关 键 词:棉铃虫  Polycalin基因  表达  Bt

Cloning and expression analysis of the polycalin gene in the cotton bollworm Helicoverpa armigera
WANG Ya-Nan,ZHONG Feng,WEI Ji-Zhen,XIE Bing-Tang,ZHANG Wan-Na,CHEN Li-Zhen,LIANG Ge-Mei.Cloning and expression analysis of the polycalin gene in the cotton bollworm Helicoverpa armigera[J].Entomological Knowledge,2015(3).
Authors:WANG Ya-Nan  ZHONG Feng  WEI Ji-Zhen  XIE Bing-Tang  ZHANG Wan-Na  CHEN Li-Zhen  LIANG Ge-Mei
Abstract:
Keywords:Helicoverpa armigera  polycalin gene  expressin  Bt toxin
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