| aiiA基因表达载体的构建及其在毕赤酵母中的表达 |
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| 作者姓名： | 娄瑞娟 张霞 罗利龙 徐操 宋水山 |
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| 作者单位： | 1. 河北省科学院生物研究所河北石家庄050051;河北工业大学化工学院,天津,300100
2. 河北省科学院生物研究所河北石家庄050051
3. 河北省科学院生物研究所河北石家庄050051;河北师范大学,河北,石家庄,050016 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金项目(No. 30970030); 国家重大基础研究前期研究专项项目(No. 2009CB126010); 河北省自然科学基金项目(No. C2006000707) |
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| 摘 要： | 构建携带N-酰基高丝氨酸内酯酶基因(aiiA)的重组毕赤酵母表达载体pPIC3.5K-aiiA,采用电转化方法转入毕赤酵母GS115,经营养缺陷型培养基、表型鉴定和高G418浓度筛选获得高拷贝表达盒的酵母转化子,用0.5%甲醇诱导表达,RT-PCR鉴定可检测到重组酵母中编码目的基因成熟肽的mRNA,SDS-PAGE和Western blot检测结果表明,aiiA基因在毕赤酵母中成功表达,用指示菌紫色杆菌CV026检测发现目的蛋白具有降解N-酰基高丝氨酸内酯的活性。
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| 关 键 词： | aiiA基因 毕赤酵母 基因表达 |
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