产γ-谷氨基甲酰胺合成酶菌株的筛选及产酶条件研究 |
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作者姓名: | 张亚丽 李平 问小强 |
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作者单位: | 1. 同济大学生命科学与技术学院,上海,200092;安徽农业大学茶与食品科技学院,合肥,230036 2. 同济大学生命科学与技术学院,上海,200092 3. 陕西西安市质量技术监督局蓝田分局,西安,710005 |
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基金项目: | 国家自然科学基金,上海市自然科学基金 |
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摘 要: | 以假单胞菌(Pseudomonas sp.)为出发菌株,通过紫外诱变筛选得到一株γ-谷氨基甲酰胺合成酶高产菌株UV-19,其酶活提高32.54%。以突变株UV-19为供试菌株,对γ-谷氨基甲酰胺合成酶的发酵条件进行优化。首先利用Plackett-Burman设计筛选出影响较大的4个因素:葡萄糖、蛋白胨、起始pH值、装液量。在此基础上再利用CCD响应面分析法进行优化,得到最佳产酶培养条件为(g/L):葡萄糖15、蛋白胨12、NaCl 5.0、MgSO4.7H2O 0.2、K2HPO4.3H2O 0.5、甲胺盐酸盐1.0g/L、起始pH值6.5、装液量72mL/250mL。该优化条件下进行产酶培养,假单胞菌发酵产γ-谷氨基甲酰胺合成酶酶活力可达32.68U/mL。
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关 键 词: | 假单胞菌 γ-谷氨基甲酰胺合成酶 紫外诱变 响应面分析 |
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