| 抗结肠癌相关抗原单链抗基因的构建和表达 |
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| 引用本文： | 宋林霞,俞炜源.抗结肠癌相关抗原单链抗基因的构建和表达[J].生物工程学报,2000,16(1):82-85. |
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| 作者姓名： | 宋林霞 俞炜源 |
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| 作者单位： | 军事医学科学院生物工程研究所,北京 |
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| 摘 要： | 通过ＰＣＲ扩增和酶切分别得到抗结肠癌相关抗原抗体的重链可变区序列，轻链可变区序列及连接肽序列，将它们构建成为ＶＨ－ｌｉｎｋｅｒ－ＶＬ形式的单链抗体基因片段，并在大肠杆菌中进行了表达，ＳＤＳ－ＰＡＧＥ分析结果表明，以ｐＣｏｍｂ３为载体，在大肠杆菌ＪＭ８３中，ｓｃＦｖ未获得有效表达，而以ｐＥＴ－２２ｂ（＋）为载体的ｓｃＦｖ在大肠杆菌ＢＬ２１（ＤＥ３）中，３０℃诱导培养获得了高效表达，表达水平占全菌蛋白
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| 关 键 词： | 结肠癌 大肠杆菌 单链抗体 免疫原体 造影诊断 |
| 文章编号： | 1000-3061(2000)01-0082-04 |
| 修稿时间： | 1998-08-03 |
Construction and
Expression of Anticolonic Cancer scFv Fragment |
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| SONG Lin-xia , YU Wei-yuan.Construction and
Expression of Anticolonic Cancer scFv Fragment[J].Chinese Journal of Biotechnology,2000,16(1):82-85. |
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| Authors: | SONG Lin-xia YU Wei-yuan |
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| Institution: | SONG Lin-xia , YU Wei-yuan ;
(Institute of Biotechnology, Academy of Military Medical Science, Beijing 100071) |
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| Abstract: | Anticolonic cancer scFv fragment with a VH-linker-VL structure was constructed and expressed in E. coli. SDS-PAGE analysis showed the fragment cloned in pComb3 was not expressed efficiently in JM83, while cloned in pET-22b(+) highly expressed in BL21(DE3) up to 35.5% of the total bacterial protein obtained, if the culture was incubated under 30 degrees C. |
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| Keywords: | Colonic cancer scFv E coli expression |
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