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AtNHX1基因对荞麦的遗传转化及抗盐再生植株的获得
作者姓名:陈利红  张波  徐子勤
作者单位:西北大学陕西省生物技术重点实验室,西安 710069;西北大学陕西省生物技术重点实验室,西安 710069;西北大学陕西省生物技术重点实验室,西安 710069
基金项目:陕西省自然科学基金项目(No. 04JS07)和省重点实验室重点项目(No. 05JK304)。
摘    要:通过农杆菌介导法将拟南芥液泡膜Na+/H+反向转运蛋白基因AtNHX1转入荞麦中,在2.0mg/L 6-BA、0.1mg/L IAA、1mg/L KT、50mg/L卡那霉素和500mg/L头孢霉素的MS培养基上进行选择培养,从来源于864块外植体的36块抗性愈伤组织中共获得426棵再生植株(转化频率为4.17%)。经PCR、Southern印迹分析、RT-PCR和Northern检测,初步证实AtNHX1基因已整合至荞麦基因组中。用200mmol/L的盐水对转基因植株和对照植株进行胁迫处理6周,转基因植株能够生存,而对照植株死亡。用不同浓度的NaCl溶液处理转基因植株和对照植株,发现Na+及脯氨酸含量在转基因植株中的积累水平显著高于对照植株,而K+的含量在转基因植株中的积累水平低于对照植株。次生代谢产物黄酮类化合物芦丁在转基因植株根、茎和叶片中的含量也比对照植株明显要高。这些结果表明利用基因工程手段提高作物的耐盐性是可行的。

关 键 词:荞麦  Na+ /H+反向转运蛋白   耐盐性   芦丁   高效液相色谱
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