| 可溶性TRAIL蛋白的高密度培养及补料策略研究 |
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| 作者姓名： | 章越沈亚领 夏小霞孙爱友魏东芝 周劲松张国钧王梁华 焦炳华 |
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| 作者单位： | 1. 华东理工大学生物化学研究所,生物反应器工程国家重点实验室,上海,200237
2. 上海恰尔生物技术有限公司,上海,200336
3. 第二军医大学基础医学部生物化学与分子生物学教研室,上海,200433 |
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| 基金项目： | 国家重大科技专项基金资助 (No .2 0 0 2AA2Z3 45A)~~ |
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| 摘 要： | 采用分批补料的方法高密度培养重组大肠杆菌C600/Pbv TRAIL制备人可溶性TRAIL蛋白,优化发酵工艺,探索简单高效的分离纯化方法并测定蛋白生物活性。通过比较几种不同的补料策略：间歇流加、Dostat、pHstat,摸索了一种流加策略,即DOstatpHstat组合流加,有效的避免了发酵过程中,尤其是诱导表达阶段乙酸积累的增加,使TRAIL蛋白在高密度培养条件下,得到高效表达。菌体密度最终达到300g/L（WCW）以上,可溶性TRAIL蛋白占菌体总蛋白的4.2%,含量为1.1g/L。在整个发酵过程中,乙酸浓度接近于0,且未使用任何特殊手段,如纯氧、加压等,简化了发酵工艺,降低了发酵成本,为TRAIL的工业化生产创造了条件。
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| 关 键 词： | 重组大肠杆菌 分批补料 发酵 TRAIL 分离纯化 |
| 文章编号： | 1000-3061(2004)03-0408-06 |
| 修稿时间： | 2003-10-29 |
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