| 桔黄赛多孢霉外泌弹性蛋白酶的生化特性 |
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| 引用本文： | 彭元怀,葛歆,叶剑芝,金蓓,韩志萍.桔黄赛多孢霉外泌弹性蛋白酶的生化特性[J].生物工程学报,2023,39(9):3800-3813. |
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| 作者姓名： | 彭元怀 葛歆 叶剑芝 金蓓 韩志萍 |
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| 作者单位： | 岭南师范学院食品科学与工程学院, 广东 湛江 524048;岭南师范学院网络与信息服务中心, 广东 湛江 524048;中国热带农业科学院农产品加工研究所, 广东 湛江 524001 |
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| 基金项目： | 湛江市科技计划项目(2020A01040)；岭南师范学院红树林研究院开放课题(YBXM12)；粤西特色生物医药工程技术研究中心开放课题(2022-K09)；岭南师范学院校级科研项目(ZL2012)；海南省自然科学基金(322MS121)；广东省普通高校重点领域专项(2020ZDZX1047) |
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| 摘 要： | 外泌弹性蛋白酶是桔黄赛多孢霉(Scedosporium aurantiacum)主要毒性蛋白酶之一，本文在前期研究的基础上，对这种蛋白酶的序列、结构和酶学特性进行了研究。首先通过柱层析技术将S. aurantiacum培养上清液中的蛋白进行了分离，然后通过酶谱电泳纯化得到了弹性蛋白酶条带。从凝胶中提取了弹性蛋白酶，通过质谱技术对其序列进行了检测，并对其反应特性、活力和反应动力学参数进行了研究。结果显示，S. aurantiacum外泌弹性蛋白酶对弹性蛋白和牛跟腱胶原蛋白(bovine achilles tendon collagen, BATC)具有较好的水解性能，对鱼皮胶原蛋白(fish skin collagen, FSC)的水解效率高于对鱼鳞明胶的水解效率，对酪蛋白的水解性最差。作用于弹性蛋白时，其催化效率小于猪胰腺弹性蛋白酶。Zn2+对酶活力有提升作用，而Ca2+、Mg2+、Na+、(2S)-2-(4S)-2-氨基-1,4,5,6-四羟基4-嘧啶基]-N-(1S)-1-羰基-3-甲基丁基]氨基]羰基]甘氨酰- N1-(1S)-1-甲基-2-氧乙基]-l-谷氨酸甲酰胺(elastatinal)和苯甲基磺酰氟(phenylmethanesulfonyl fluoride, PMSF)均对酶活有抑制作用。该蛋白酶和青霉(Paecilomyces lilacinus)外泌丝氨酸蛋白酶(PDB Entry: c3f7oB_)的序列最相似，且有多段保守序列的氨基酸个数多于7个，可以作为PCR反应引物设计的模板。酶学特性实验表明，S. aurantiacum外泌弹性蛋白酶对肺组织中的弹性蛋白具有降解作用，其蛋白表达和毒性机制需要进一步的研究。
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| 关 键 词： | 桔黄赛多孢霉 弹性蛋白酶 蛋白结构 酶学特性 |
| 收稿时间： | 2022/11/14 0:00:00 |
Biochemical properties of Scedosporium aurantiacum extracellular elastase-like protease |
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| PENG Yuanhuai,GE Xin,YE Jianzhi,JIN Bei,HAN Zhiping.Biochemical properties of Scedosporium aurantiacum extracellular elastase-like protease[J].Chinese Journal of Biotechnology,2023,39(9):3800-3813. |
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| Authors: | PENG Yuanhuai GE Xin YE Jianzhi JIN Bei HAN Zhiping |
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| Institution: | College of Food Science and Technology, Lingnan Normal University, Zhanjiang 524048, Guangdong, China;Network & Information Center of Lingnan Normal University, Zhanjiang 524048, Guangdong, China;Agricultural Products Processing Research Institute, Chinese Academy of Tropical Agricultural Sciences, Zhanjiang 524001, Guangdong, China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Scedosporium aurantiacum elastase-like protease protein structure enzymatic properties |
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