| Thr28突变对虎纹捕鸟蛛毒素-Ⅳ钠通道活性的影响 |
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| 引用本文： | 邓梅春,罗旋,陈汉春,王军,梁宋平.Thr28突变对虎纹捕鸟蛛毒素-Ⅳ钠通道活性的影响[J].生命科学研究,2013,17(2):111-115. |
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| 作者姓名： | 邓梅春 罗旋 陈汉春 王军 梁宋平 |
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| 作者单位： | 1. 中南大学生命科学学院生物化学系,中国湖南长沙,410013
2. 湖南师范大学生命科学学院蛋白质化学与发育生物学教育部重点实验室,中国湖南长沙,410081 |
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| 基金项目： | 国家重点基础研究发展计划项目(973计划)(项目编号：2010CB529801),国家自然科学基金资助项目(项目编号：31100764),中国博上后科学基金资助项目(项目编号：2012M521536)湖南省博士后科研资助专项计划项目(项目编号：2012RS4015)中南大学自由探索计划项目(项目编号：2011QNZT131)中南大学博上后科学基金 |
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| 摘 要： | 虎纹捕鸟蛛毒素-Ⅳ(HWTX-Ⅳ)是从虎纹捕鸟蛛粗毒中分离纯化到的一种新型多肽类神经毒素,能明显抑制表达于大鼠背根神经节细胞的河豚毒素敏感型(TTX-S)钠通道.为了更好地研究该毒素的结构与功能之间的关系,采用芴甲氧羰基(Fmoc)固相多肽化学合成法合成了用谷氨酸(Glu)替代HWTX-Ⅳ第28位苏氨酸残基的突变体T28D-HWTX-Ⅳ,线性多肽合成产物经反相高效液相色谱(HPLC)分离纯化后进行谷胱甘肽氧化复性.复性产物采用基质辅助激光解析飞行时间质谱(MALDI-TOF/TOF MS)技术鉴定分子质量,通过全细胞膜片钳电生理技术测定其电压门控钠通道药理学活性.当第28位Thr残基被Glu取代后,突变体T28D-HWTX-Ⅳ对表达于大鼠DRG细胞膜上的TTX-S钠通道的IC50值约为362 nmol/L,对TTX-S钠通道的抑制活性比天然HWTX-Ⅳ(IC50值=30 nmol/L)下降了约12倍,显示第28位的Thr残基是HWTX-Ⅳ与TTX-S型钠通道相互作用的关键活性残基.目前的研究为进一步探索HWTX-Ⅳ的结构与功能关系及新型镇痛药物的研发奠定了基础.
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| 关 键 词： | 虎纹毒素-Ⅳ(HWTX-Ⅳ) 突变体 固相多肽合成 氧化复性 钠通道 |
Effects of Thr28 Mutation on Sodium Channels Activity of HWTX-Ⅳ |
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| DENG Mei-chun
,
LUO Xuan
,
CHEN Han-chun
,
WANG Jun
,
LIANG Song-ping.Effects of Thr28 Mutation on Sodium Channels Activity of HWTX-Ⅳ[J].Life Science Research,2013,17(2):111-115. |
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| Authors: | DENG Mei-chun LUO Xuan CHEN Han-chun WANG Jun LIANG Song-ping |
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| Institution: | 1.Department of Biochemistry,School of Life Sciences,Central South University,Changsha 410013,Hunan,China;2.Key Laboratory of Protein Chemistry and Developmental Biology of Ministry of Education,College of Life Sciences,Hunan Normal University,Changsha 410081,Hunan,China) |
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