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重组人甲状旁腺激素肽(1-34)在大肠杆菌中的高效融合表达及纯化
引用本文:李健峰,肖红剑,姬秋彦,李智华,龙海亭,阎玲梅,罗娜,徐维明.重组人甲状旁腺激素肽(1-34)在大肠杆菌中的高效融合表达及纯化[J].中国生物工程杂志,2006,26(3):26-30.
作者姓名:李健峰  肖红剑  姬秋彦  李智华  龙海亭  阎玲梅  罗娜  徐维明
作者单位:中国医学科学院中国协和医科大学医学生物学研究所 中国医学科学院中国协和医科大学医学生物学研究所 中国医学科学院中国协和医科大学医学生物学研究所
摘    要:人工合成人甲状旁腺激素1-34肽段 (PTH1-34)的cDNA序列,克隆到大肠杆菌蛋白表达载体pThioHis中,获得了高表达菌株。经发酵、破菌、金属鳌合层析、反相层析和凝胶层析后获得了纯度大于95%的hPTH1-34。hPTH1-34肽N端测序和质谱分子量测定结果与天然PTH1-34一致。生物学活性研究表明,hPTH1-34在体外具有刺激腺苷酸环化酶的作用。

关 键 词:融合表达  人甲状旁腺激素  大肠杆菌  
收稿时间:2006-02-10
修稿时间:2005年6月29日

Expression and Purification of Human Parathyroid Hormone Peptide ( 1-34 ) in Escherichia coli
LI Jian-feng,XIAO Hong-jian,JI Qiu-yan,LI Zhi-hua,LONG Hai-ting,YAN Ling-mei,LUO Na,XU Wei-ming.Expression and Purification of Human Parathyroid Hormone Peptide ( 1-34 ) in Escherichia coli[J].China Biotechnology,2006,26(3):26-30.
Authors:LI Jian-feng  XIAO Hong-jian  JI Qiu-yan  LI Zhi-hua  LONG Hai-ting  YAN Ling-mei  LUO Na  XU Wei-ming
Abstract:Human parathyroid hormone peptide1-34(hPTH1-34) was highly expressed in Escherichia coli by inserting the synthesized hPTH1-34 cDNA into pThioHis, the prokaryotic expression vector. The expressed hPTH1-34 was purified by chelating sepharose immobilized metal ion affinity, reverse and filter chromatographic steps. Its purity was verified above 95% by HPLC. The quality was identified by N-terminal sequencing and MALDI-TOF-MS analysis. In vitro analysis showed the adenylate cyclase of ROS 17/2.8 cells was activated by hPTH1-34.
Keywords:Human parathyroid hormone Escherichia coli Fusion expression  
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