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高灵敏可视化核酸试纸条法快速检测 HBV DNA
引用本文:杨贤,黄欢,殷竹君,武海萍,周国华.高灵敏可视化核酸试纸条法快速检测 HBV DNA[J].现代生物医学进展,2011,11(7).
作者姓名:杨贤  黄欢  殷竹君  武海萍  周国华
作者单位:1. 南京医科大学基础医学院,江苏南京,210029
2. 华东医学生物技术研究所,江苏南京,210002
3. 江苏出入境检验检疫局,江苏南京,200001
基金项目:江苏省自然科学基金,国家自然科学基金
摘    要:目的:本研究旨在建立一种基于试纸条的快速、灵敏及可视化检测乙型肝炎病毒核酸的方法.方法:利用聚合酶链反应扩增乙肝病毒的保守区,其中上、下游引物的5'端分别修饰异硫氰酸荧光素和生物素.核酸试纸条上的胶体金以及检测线处分别标记有链霉亲和素以及抗荧光素抗体.将扩增产物与展开液混合后点样,10min 后即可用肉眼判读结果.在优化了展开液成分、上样体积以及上样浓度之后,对该方法的灵敏度进行了评价.最后收集15例阴性样本及33例HBsAg 阳性样本,按血清标志物结果进行分类后使用核酸试纸条进行检测,并与实时荧光PCR的结果进行了比较.结果:试纸条检测乙肝病毒核酸的灵敏度为250eopies/mL.在临床样本的测定中,该方法与实时荧光定量PCR的特异性均为100%.且两种方法检测不同血清标志物类型的阳性检出率无差异.结论:核酸试纸条技术能够用于乙肝病毒核酸的可视化检测,与实时荧光PCR相比检测速度快,具有较好的灵敏度和特异性,适合流行病学调查以及在基层医院体检使用.

关 键 词:核酸试纸条法  聚合酶链反应  乙肝病毒DNA

Development of a sensitive, visual nucleic acid dipstick assay for rapid detection of hepatitis B virus DNA
YANG Xian,HUANG Huan,YIN Zhu-jun,WU Hai-ping,ZHOU Guo-hua.Development of a sensitive, visual nucleic acid dipstick assay for rapid detection of hepatitis B virus DNA[J].Progress in Modern Biomedicine,2011,11(7).
Authors:YANG Xian  HUANG Huan  YIN Zhu-jun  WU Hai-ping  ZHOU Guo-hua
Abstract:
Keywords:
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