| 棉铃虫Ⅰ型几丁质酶的表达 |
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| 引用本文： | 古新蓉,麦麦提艾力·阿卜杜纳斯尔,李梦鸽,王新,随慧,包静,刘小宁. 棉铃虫Ⅰ型几丁质酶的表达[J]. 环境昆虫学报, 2019, 41(5) |
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| 作者姓名： | 古新蓉 麦麦提艾力·阿卜杜纳斯尔 李梦鸽 王新 随慧 包静 刘小宁 |
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| 作者单位： | 新疆大学,新疆生物资源基因工程重点实验室,乌鲁木齐830046;新疆大学,新疆生物资源基因工程重点实验室,乌鲁木齐830046;新疆大学,新疆生物资源基因工程重点实验室,乌鲁木齐830046;新疆大学,新疆生物资源基因工程重点实验室,乌鲁木齐830046;新疆大学,新疆生物资源基因工程重点实验室,乌鲁木齐830046;新疆大学,新疆生物资源基因工程重点实验室,乌鲁木齐830046;新疆大学,新疆生物资源基因工程重点实验室,乌鲁木齐830046 |
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| 摘 要： | 昆虫几丁质酶主要参与昆虫蜕皮、围食膜降解、细胞增殖、机体免疫防御、生长因子等重要生理生长发育过程。在本研究中,从NCBI下载棉铃虫几丁质酶序列,并克隆验证正确,构建的系统发育树表明属于Ⅰ型几丁质酶。将不包含信号肽的开放阅读框序列(1 707 bp)与pET28a载体连接,转化至大肠杆菌transetta(DE3)中进行诱导表达,Western blot进一步验证融合蛋白His-HaCHT。用镍柱子纯化融合蛋白,纯化获得的融合蛋白对胶体几丁质有降解活性,其酶活力为0.023μg/mL·s~(-1)。不同龄期的qPCR结果显示,该基因在棉铃幼虫的6个幼虫期以及预蛹蜕皮后均有表达,但HaCHTI在4龄和6龄幼虫阶段表达相对较高,而在1龄、2龄、3龄、5龄幼虫和预蛹表达量较低。这些结果表明,异源表达的棉铃虫的I型几丁质酶对胶体几丁质具有降解活性,可能对棉铃虫正常蜕皮有着重要的作用。
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| 关 键 词： | 棉铃虫 几丁质酶 表达纯化 酶活性 |
Expression of group I chitinase from Helicoverpa armigera |
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