谷氨酸棒杆菌一步法发酵糖质原料生产γ-聚谷氨酸 |
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引用本文: | 程慧,陈园园,朱亚鑫,曹蓉,徐国强,张晓梅,史劲松,许正宏.谷氨酸棒杆菌一步法发酵糖质原料生产γ-聚谷氨酸[J].生物工程学报,2020,36(2):295-308. |
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作者姓名: | 程慧 陈园园 朱亚鑫 曹蓉 徐国强 张晓梅 史劲松 许正宏 |
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作者单位: | 1 江南大学 工业生物技术教育部重点实验室,江苏 无锡 214122;2 江南大学 粮食发酵与工艺技术国家工程实验室,江苏 无锡 214122;3 江南大学 生物工程学院,江苏 无锡 214122,1 江南大学 工业生物技术教育部重点实验室,江苏 无锡 214122;2 江南大学 粮食发酵与工艺技术国家工程实验室,江苏 无锡 214122;3 江南大学 生物工程学院,江苏 无锡 214122,1 江南大学 工业生物技术教育部重点实验室,江苏 无锡 214122;2 江南大学 粮食发酵与工艺技术国家工程实验室,江苏 无锡 214122;3 江南大学 生物工程学院,江苏 无锡 214122,1 江南大学 工业生物技术教育部重点实验室,江苏 无锡 214122;2 江南大学 粮食发酵与工艺技术国家工程实验室,江苏 无锡 214122;3 江南大学 生物工程学院,江苏 无锡 214122,1 江南大学 工业生物技术教育部重点实验室,江苏 无锡 214122;2 江南大学 粮食发酵与工艺技术国家工程实验室,江苏 无锡 214122;3 江南大学 生物工程学院,江苏 无锡 214122,4 江南大学 药学院,江苏 无锡 214122,4 江南大学 药学院,江苏 无锡 214122,1 江南大学 工业生物技术教育部重点实验室,江苏 无锡 214122;2 江南大学 粮食发酵与工艺技术国家工程实验室,江苏 无锡 214122;3 江南大学 生物工程学院,江苏 无锡 214122 |
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基金项目: | 轻工技术与工程国际一流学科建设项目 (No. LITE2018-11),高等学校学科创新引智计划 (No. 111-2-06),江南大学合成生物系统与生物智造国际联合实验室项目,江苏省六大人才高峰项目 (No. 2015-SWYY-006),江苏高校品牌专业建设工程项目 (TAPP) 资助。 |
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摘 要: | γ-聚谷氨酸在食品、化妆品、生物医药等领域具有广泛的应用,目前主要的生产菌株是谷氨酸依赖型菌株,在生产过程中需要添加谷氨酸作为前体,因而生产γ-聚谷氨酸的成本较高。文中主要研究从糖质原料一步法发酵合成γ-聚谷氨酸的生产工艺。首先,从产γ-聚谷氨酸的菌株枯草芽孢杆菌中克隆γ-聚谷氨酸合成酶的基因簇pgs BCA,在谷氨酸棒杆菌模式菌株ATCC13032中进行诱导型和组成型表达,结果显示,仅诱导型表达菌株可以积累γ-聚谷氨酸,产量为1.43 g/L。进一步对诱导条件进行优化,确定诱导时间为2 h,IPTG浓度为0.8 mmol/L,γ-聚谷氨酸产量为1.98g/L。在此基础上,在一株高产谷氨酸的谷氨酸棒杆菌F343中外源表达pgs BCA,对重组菌进行发酵,结果表明,在摇瓶发酵中γ-聚谷氨酸产量达到10.23g/L,在5L发酵罐中产量达到20.08g/L;继而对γ-聚谷氨酸进行分子量测定,结果显示,产自F343重组菌的γ-聚谷氨酸的重均分子量比产自枯草芽孢杆菌的提高34.77%。文中构建了一步法发酵糖质原料生产γ-聚谷氨酸的新途径,同时为开发其潜在应用奠定了基础。
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关 键 词: | Γ-聚谷氨酸 谷氨酸棒杆菌 一步法发酵 糖质原料 pgsBCA |
收稿时间: | 2019/2/22 0:00:00 |
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