| 一种来自乳酸乳球菌的新型氨肽酶A的制备及特性分析 |
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| 引用本文： | 田鑫,刘金洲,何忠会,陈琳方,刘梦元.一种来自乳酸乳球菌的新型氨肽酶A的制备及特性分析[J].生物工程学报,2023,39(8):3494-3507. |
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| 作者姓名： | 田鑫 刘金洲 何忠会 陈琳方 刘梦元 |
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| 作者单位： | 湖北大学生命科学学院 生物催化与酶工程国家重点实验室, 湖北 武汉 430062;湖北中医药大学检验学院, 湖北 武汉 430065 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金(30973669)；省部共建生物催化与酶工程国家重点实验室开放基金(SKLBEE2020023) |
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| 摘 要： | 氨肽酶A(aminopeptidase A,Pep A)能特异性地水解N末端为谷氨酸(glutamic acid,Glu)或天冬氨酸(asparticacid,Asp)的肽链,提高蛋白质的水溶性和食物的风味,在食品工业和肉类加工中具有一定的应用前景。本研究采用全基因合成的方式获得了乳酸乳球菌(Lactococcus lactis ssp.lactis)IL1403氨肽酶A(Lactococcus lactis-Pep A,Lc-Pep A)的编码基因,将该基因克隆并导入毕赤酵母(Pichia pastoris)GS115(His4),在毕赤酵母中实现了Lc-Pep A的高效分泌表达,表达产物经鉴定和纯化制备后,进行了生物学特性的分析。结果表明,Lc-Pep A具有较强的底物特异性,对2种底物谷氨酸对硝基苯胺(glutamicacid-p-nitroaniline,Glu-pNA)和天冬氨酸对硝基苯胺(aspartic acid-p-nitroaniline,Asp-pNA)具有相似的催化活力和酶动力学参数。Lc-Pep A是一种金属蛋白酶,最适反应温度为60℃,最适pH为8.0,具有较宽的热稳定性和酸碱稳定性。金属离子Co^(2+)、Mn^(2+)及Zn^(2+)等对酶活力具有不同程度的激活作用,而Ni^(2+)和Cu^(2+)对酶活力具有强烈的抑制作用。Lc-Pep A对常规蛋白酶抑制剂不敏感,但能被金属蛋白酶抑制剂、EDTA及二硫键还原剂抑制。这些研究为Lc-Pep A的生产和指导该酶的应用打下了坚实的基础。
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| 关 键 词： | 氨肽酶A 乳酸乳球菌 食品工业 肉类加工 |
| 收稿时间： | 2023/4/17 0:00:00 |
| 修稿时间： | 2023/6/1 0:00:00 |
Production and characterization of a novel aminopeptidase A from Lactococcus lactis |
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| TIAN Xin,LIU Jinzhou,HE Zhonghui,CHEN Linfang,LIU Mengyuan.Production and characterization of a novel aminopeptidase A from Lactococcus lactis[J].Chinese Journal of Biotechnology,2023,39(8):3494-3507. |
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| Authors: | TIAN Xin LIU Jinzhou HE Zhonghui CHEN Linfang LIU Mengyuan |
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| Institution: | State Key Laboratory of Biocatalysis and Enzymatic Engineering, School of Life Sciences, Hubei University, Wuhan 430062, Hubei, China;School of Laboratory Medicine, Hubei University of Chinese Medicine, Wuhan 430065, Hubei, China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | aminopeptidase A Lactococcus lactis subspecies lactis food industry meet processing |
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