| 基于N蛋白单克隆抗体的小反刍兽疫病毒抗体检测胶体金试纸条的研制 |
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| 作者姓名： | 董帅 孟卫芹 莫玲 陈金龙 石竞楠 杨哲 李通 徐倩倩 沈志强 刘建钗 王金良 |
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| 作者单位： | 河北工程大学生命科学与食品工程学院, 河北 邯郸 056038;山东省滨州畜牧兽医研究院, 山东 滨州 256600;石河子大学动物科技学院, 新疆 石河子 832003;内蒙古民族大学生命科学与食品学院, 内蒙古 通辽 028000;青岛农业大学动物医学院, 山东 青岛 266109 |
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| 基金项目： | 山东省羊产业技术体系岗位专家项目(SDAIT-10-07) |
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| 摘 要： | 本研究旨在建立一种简便、快捷、可直观检测小反刍兽疫病毒(peste des petits ruminants virus,PPRV)抗体的检测方法。将pET-32a-N重组质粒转化至大肠杆菌(Escherichia coli) Rosetta(DE3)感受态细胞中进行诱导表达,以纯化的PPRVN蛋白免疫8周龄BALB/c小鼠,取其脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞进行融合,间接酶联免疫吸附试验(enzyme-linked immunosorbent assays, ELISA)筛选及亚克隆,获得了抗PPRV N蛋白的单克隆抗体。将PPRV N蛋白分别作为金标抗原及检测线(T线)包被抗原、单克隆抗体作为质控线(C线)包被抗体,组装成检测PPRVN蛋白抗体的胶体金免疫层析试纸条。结果显示：成功获得1株能稳定分泌抗N蛋白抗体的杂交瘤细胞株,命名为1F1;间接ELISA检测1F1腹水效价为1:128000;亚类鉴定结果为IgG1,轻链为kappa链。Westernblotting结果显示,1F1能与PPRV N蛋白特异性结合;间接免疫荧光(indirect immunofluorescent ass...
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| 关 键 词： | 小反刍兽疫病毒 N蛋白 单克隆抗体 胶体金 抗体检测 |
| 收稿时间： | 2023-04-23 |
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