| 黄瓜CsERECTA基因的原核表达及其多克隆抗体制备 |
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| 引用本文： | 王琪琦,李玉红,胡亮亮,秦亚光,赵子瑶,陈 鹏.黄瓜CsERECTA基因的原核表达及其多克隆抗体制备[J].西北植物学报,2016,36(5):1031-1038. |
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| 作者姓名： | 王琪琦 李玉红 胡亮亮 秦亚光 赵子瑶 陈 鹏 |
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| 作者单位： | (1 西北农林科技大学 园艺学院，陕西杨陵 712100；2 西北农林科技大学 生命科学学院，陕西杨陵 712100) |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金（31071791）； |
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| 摘 要： | ERECTA基因编码一个富含亮氨酸重复序列结构的丝/苏氨酸类受体蛋白激酶,参与调控植物器官的形态建成,在株型控制及抗逆方面也有重要作用。该研究通过构建带有maltose binding protein(MBP)标签的pET21a-CsERECTA融合蛋白原核表达载体,实现了在大肠杆菌(E.coli)BL21(DE3)中的高效表达,并对诱导表达的温度、时间和IPTG浓度进行了优化。利用镍离子螯合层析纯化得到MBP-CsERECTA融合蛋白,再用rTEV蛋白酶对其进行酶切,得到CsERECTA蛋白并制备了该蛋白的多克隆抗体。结果表明,黄瓜CsERECTA蛋白以可溶和包涵体2种形式表达,低温有助于蛋白以可溶性形式大量存在。最佳诱导温度为23℃,诱导时间为6h,IPTG浓度为0.5mmol·L~(-1)。通过Western blot可检测到黄瓜内源的CsERECTA蛋白,说明制备的多可隆抗体具有较好的特异性。多克隆抗体的成功制备为进一步研究CsERECTA的功能奠定了基础。
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| 关 键 词： | 黄瓜 CsERECTA基因 原核表达 多克隆抗体 |
Prokaryotic Expression of Cucumber CsERECTA Gene and Preparation of Its Polyclonal Antibody |
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| WANG Qiqi,LI Yuhong,HU Liangliang,QIN Yaguang,ZHAO Ziyao,CHEN Peng.Prokaryotic Expression of Cucumber CsERECTA Gene and Preparation of Its Polyclonal Antibody[J].Acta Botanica Boreali-Occidentalia Sinica,2016,36(5):1031-1038. |
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| Authors: | WANG Qiqi LI Yuhong HU Liangliang QIN Yaguang ZHAO Ziyao CHEN Peng |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | cucumber CsERECTA gene prokaryotic expression polyclonal antibodies |
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