| 中国首次分离的辛德毕斯病毒XJ-160病毒株感染性全基因组cDNA克隆的构建与分析 |
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| 引用本文： | 杨益良,梁国栋,付士红,何海怀,李晓宇,邓娟,苏乃伦,王力华,侯云德.中国首次分离的辛德毕斯病毒XJ-160病毒株感染性全基因组cDNA克隆的构建与分析[J].病毒学报,2005,21(3):173-180. |
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| 作者姓名： | 杨益良 梁国栋 付士红 何海怀 李晓宇 邓娟 苏乃伦 王力华 侯云德 |
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| 作者单位： | 中国疾病预防控制中心,病毒病预防控制所,病毒基因工程国家重点实验室,北京,100052 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金;39970037; |
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| 摘 要： | 报告了中国首次分离的辛德毕斯病毒XJ-160株的感染性全基因组cDNA克隆的构建与鉴定。利用RT—PCR方法获得覆盖病毒全长基因组的cDNA片段，以低拷贝质粒pBR322作为骨架，将基因组cDNA置于SP6RNA聚合酶启动子之后，基因组3’末端带有35个连续的A，通过DNA重组技术组装成病毒基因组全长cDNA克隆。该克隆可在大肠杆菌DH5a中稳定扩增。经体外转录，RNA转录体转染BHK-21细胞，细胞发生病变，恢复病毒滴度达到10^7～10^8PFU／ml。全基因组cDNA克隆构建过程中引入的沉默突变(8453位核苷酸由C变为T)产生XbaⅠ酶切位点作为遗传标记，在子代恢复病毒的基因组中稳定存在。从细胞病变的特征、BHK-21细胞的空斑形态、病毒的抗原性、病毒在细胞中的生长动力学特征以及对乳鼠的致病性等方面比较，恢复病毒和亲本病毒XJ-160没有显著区别，提示获得了具有感染性的XJ-160病毒全长cDNA克隆。该病毒感染性全基因组cDNA克隆可以作为反向遗传学系统，为进一步研究病毒复制和致病机制，以及开发相应的载体表达系统提供分子生物学工具。
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| 关 键 词： | 感染性全基因组cDNA克隆 恢复病毒 辛德毕斯病毒 XJ-160病毒株 中国 分离 |
| 文章编号： | 1000-8721(2005)03-0173-08 |
Construction and Infection Analysis of the Full-length cDNA Clone of XJ-160 Virus, the First Sindbis Virus Isolated in China |
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| YANG Yi-liang,LIANG Guo-dong,FU Shi-hong,HE Hai-huai,LI Xiao-yu,Deng Juan,SU Nai-lun,WANG Li-hua,HOU Yun-de.Construction and Infection Analysis of the Full-length cDNA Clone of XJ-160 Virus, the First Sindbis Virus Isolated in China[J].Chinese Journal of Virology,2005,21(3):173-180. |
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| Authors: | YANG Yi-liang LIANG Guo-dong FU Shi-hong HE Hai-huai LI Xiao-yu Deng Juan SU Nai-lun WANG Li-hua HOU Yun-de |
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| Keywords: | infectious cDNA clone recovered virus Sindbis virus XJ-160 virus |
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