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小反刍兽疫病毒基因组全长cDNA的构建及其序列的测定
引用本文:翟军军,窦永喜,张海瑞,毛立,蒙学莲,骆学农,才学鹏. 小反刍兽疫病毒基因组全长cDNA的构建及其序列的测定[J]. 病毒学报, 2010, 26(4)
作者姓名:翟军军  窦永喜  张海瑞  毛立  蒙学莲  骆学农  才学鹏
作者单位:中国农业科学院,兰州兽医研究所,家畜疫病病原生物学国家重点实验室,甘肃省动物寄生虫病重点实验室,兰州,730046;中国农业科学院,兰州兽医研究所,家畜疫病病原生物学国家重点实验室,甘肃省动物寄生虫病重点实验室,兰州,730046;中国农业科学院,兰州兽医研究所,家畜疫病病原生物学国家重点实验室,甘肃省动物寄生虫病重点实验室,兰州,730046;中国农业科学院,兰州兽医研究所,家畜疫病病原生物学国家重点实验室,甘肃省动物寄生虫病重点实验室,兰州,730046;中国农业科学院,兰州兽医研究所,家畜疫病病原生物学国家重点实验室,甘肃省动物寄生虫病重点实验室,兰州,730046;中国农业科学院,兰州兽医研究所,家畜疫病病原生物学国家重点实验室,甘肃省动物寄生虫病重点实验室,兰州,730046;中国农业科学院,兰州兽医研究所,家畜疫病病原生物学国家重点实验室,甘肃省动物寄生虫病重点实验室,兰州,730046
基金项目:农业公益性行业科研专项(200803018); 甘肃省国际合作项目(0804WCGA133)
摘    要:根据小反刍兽疫Nigeria75/1株全基因组序列设计并合成PPRV特异引物,进而应用RT-PCR技术分5段扩增了PPRV全基因组cDNA。将扩增的各个cDNA重叠片段JF1、JF2、JF3、JF4和JF5分别克隆到载体上,建立了PPRV的初级cDNA克隆。在扩增5′末端时,引入AscI酶切位点和T7启动子序列;在基因组3′末段引入PacI酶切位点,后者供cDNA模板的线性化之用。将扩增片段再依次连接,最后亚克隆到质粒pok12中,获得了PPRV全长基因组cDNA克隆pok12-PPRV。通过序列同源性和进化树分析,结果表明,Nigeria75/1与MV和RPV的遗传关系最近。Nigeria75/1株全长cDNA的序列测定及构建,为拯救PPRV和在分子水平进一步深入研究PPRV打下坚实的基础。

关 键 词:小反刍兽疫病毒  RT-PCR  全长cDNA克隆  分子克隆

Construction and Sequencing of Full-length cDNA of Peste des Petits Ruminants Virus
ZHAI Jun-jun,DOU Yong-xi,ZHANG Hai-rui,MAO Li,MENG Xue-lian,LUO Xuo-nong,CAI Xue-peng. Construction and Sequencing of Full-length cDNA of Peste des Petits Ruminants Virus[J]. Chinese journal of virology, 2010, 26(4)
Authors:ZHAI Jun-jun  DOU Yong-xi  ZHANG Hai-rui  MAO Li  MENG Xue-lian  LUO Xuo-nong  CAI Xue-peng
Affiliation:ZHAI Jun-jun,DOU Yong-xi,ZHANG Hai-rui,MAO Li,MENG Xue-lian,LUO Xuo-nong,CAI Xue-peng(Key Laboratory of Veterinary Parasitology of Gansu Province,State Key Laboratory of Veterinary Etiological Biology,Lanzhou Veterinary Research Institute,Chinese Academy of Agricultural Sciences,Gansu 730046,China)
Abstract:
Keywords:Peste des petits ruminants virus  RT-PCR  full-length cDNA clone  molecular cloning  
本文献已被 CNKI 万方数据 等数据库收录!
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