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嗜肺军团菌mip/ctxB融合基因体外表达与动物免疫试验的免疫原性研究
引用本文:王涛,陈建平,郅克谦,陶大昌,杨春蕾,张雷.嗜肺军团菌mip/ctxB融合基因体外表达与动物免疫试验的免疫原性研究[J].生物化学与生物物理进展,2004,31(9):818-823.
作者姓名:王涛  陈建平  郅克谦  陶大昌  杨春蕾  张雷
作者单位:1. 四川大学华西医学中心基础医学与法医学院寄生虫学教研室,成都,610041
2. 西安交通大学口腔医学院颌面外科,西安,710004
3. 四川大学华西医院,成都,610041
4. 四川大学生命科学院医学细胞生物学教研室,成都,610041
5. 大理学院微生物学教研室,大理,671000
基金项目:国家自然科学基金资助项目(30300302).
摘    要:PCR扩增嗜肺军团菌mip基因和霍乱弧菌ctxB基因,克隆入载体pcDNA3.1(+),重组子经限制性酶切分析、PCR、序列分析鉴定正确后,命名为pcDNA3.1-mip/ctxB.脂质体法将重组质粒pcDNA3.1-mip、pcDNA3.1-mip/ctxB转染NIH3T3细胞,用免疫荧光法和蛋白质印迹鉴定瞬时表达和稳定表达产物,结果发现:重组质粒成功转入细胞并获得短暂表达,稳定转染细胞分别在24 ku和35 ku处检测到阳性杂交信号.将pcDNA3.1-mip、pcDNA3.1-mip/ctxB作为DNA疫苗免疫BALB/c小鼠,检测免疫小鼠体内抗原特异性抗体水平、脾淋巴细胞增殖活性、IFN-γ产生水平、细胞毒性T淋巴细胞(CTL)杀伤活性等体液免疫和细胞免疫反应的指标,评价疫苗的免疫原性.结果发现:各实验组均检测到免疫原性,pcDNA3.1-mip/ctxB免疫组的免疫原性高于pcDNA3.1-mip免疫组,有显著性差异(P<0.01).研究结果为mip/ctxB融合基因DNA疫苗的研制提供了初步的实验依据.

关 键 词:嗜肺军团菌,霍乱弧菌,mip/ctxB融合基因,体外表达,免疫原性
收稿时间:2004/3/16 0:00:00
修稿时间:2004/5/30 0:00:00

Study of Expression In vitro and Immunogenicity of mip/ctxB Fusion Gene of Legionella pneumophila
WANG Tao,CHEN Jian-Ping,ZHI Ke-Qian,TAO Da-Chang,YANG Chun-Lei and ZHANG Lei.Study of Expression In vitro and Immunogenicity of mip/ctxB Fusion Gene of Legionella pneumophila[J].Progress In Biochemistry and Biophysics,2004,31(9):818-823.
Authors:WANG Tao  CHEN Jian-Ping  ZHI Ke-Qian  TAO Da-Chang  YANG Chun-Lei and ZHANG Lei
Abstract:
Keywords:Legionella pneumophila  Vibrio cholerae  mip/ctxB fusion gene  expression in vitro  immunogenicity
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