基于RNAi技术的转基因玉米逆转录数字PCR检测方法 |
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引用本文: | 杨镇州,刘刚,许丽.基于RNAi技术的转基因玉米逆转录数字PCR检测方法[J].生物技术通报,2020(5):56-63. |
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作者姓名: | 杨镇州 刘刚 许丽 |
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作者单位: | 上海市计量测试技术研究院 |
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基金项目: | 转基因生物新品种培育重大专项(2018ZX0801104B-004)。 |
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摘 要: | 针对基于RNAi技术的转基因玉米品系,研究并建立了一套逆转录芯片式数字PCR(dPCR)定量检测该品系玉米双链RNA的方法。研究内容主要包括RNA提取方法、引物探针设计、逆转录方法、dPCR反应条件及体系等方面的探索和优化。该方法的绝对定量限为2.5 copies/μL,RSD为12.4%;检测低浓度实际样品达21.7 copies/μL时,相对偏差为2.7%,RSD为14.6%,满足国际上转基因定量结果RSD≤25%的要求。将该方法用于基于RNAi技术转基因作物的定量检测,将为我国相关转基因作物的安全评价提供了精确可靠的技术手段。
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关 键 词: | RNAI 数字PCR 转基因玉米 |
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