| 摘 要： | ![]()
鲫鱼群体内，个体之间的生长速度差别不大，遗传保守性较强，用常规育种方法很难获得生长速度快、个体差异较大的后代。通过基因转移技术，将外源基因如鱼的生长激素基因导入鱼的受精卵中，而获得转基因鱼是钱定向育种的一条有效途径。已有报道，在虹鳟鱼生长激素cDNA上游连结一个病毒启动子构建成表达质粒，由此获得的转基因鲤鱼比对照生长速度快20％。但是未见有将鲤鱼生长激素基因导入鲫鱼受精卵的报导。我们克隆了鲤鱼生长激素基因，并用它构建了含有病毒启动子（F.1,插入0．8Kb，位于XbaI和PstI之间)的表达质粒（Fig.2,命名为pCMV－TK－CGH）。用该质粒对鲫鱼受精卵进行注射，注射了1000粒卵，获得了转基因实验鲫鱼480尾。孵化率为48％。将其中100尾幼鱼于水簇箱中进行放养。选择其中个体较大的50尾进行PCR检测。其中8条鱼的基因组DNA有0．6Kb的PCR扩增产物（Fig.3)，表明其上整合有外源的鲤鱼生长激素基因，其整合率为16％。其中最大的一条体重4．2g，体和6cm，比对照（0．7g，4cm）体重增加5倍，体长增加2cm(Fig.4)。我们构建的是高效表达质粒，其上含有巨细胞病毒增强子和人单纯疱疹病毒胸苷激酶启动子（属强启动子），对鲤鱼生长激素基因有较强的启动作用。鲤鱼和鲫鱼在分类上属同科不同属，考虑到两者生长激素基因有较强的启动作用。鲤鱼和鲫鱼在分类上属同科不同属，考虑到两者生长激素基因的同源性，对转基因鲫鱼的PCR检测参照了加拿大学者Du所用引物的设计、使注射的外源基因与其本身的内源生长激素基因相区别。我们的转基因整合率（16％）与Zhang(10%)、Grass和Hackett等报道的接近。转基因鲫鱼生长速度增加的倍数（5倍）与Du等人的结果（2－6）接近。但是，这一生长速度快的优势能否遗传给后代，有待进一步观察。
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