| 摘 要： | 目的探讨PI3K/AKT信号通路在电针动员SD大鼠骨髓内皮祖细胞(endothelial progenitor cells, EPCs)至外周血的作用研究。方法采用线栓法制备SD大鼠局灶脑缺血/再灌注模型,以"百会"穴(GV 20)及左侧"四关"穴(合谷LI4/太冲LR 3)为治疗穴位。腹腔注射PI3K特异性抑制剂LY294002阻断PI3K/AKT通路。192只雄性SD大鼠随机分为假手术组(Sham)、缺血组(I/R)、缺血+电针组(I/RE)及缺血+电针+LY294002组(I/REL)。脑缺血90min,根据再灌注时间,将各组分为再灌注24h、48h和7d三个亚组。采用流式细胞术检测骨髓和外周血CD34+EPCs数量,ELISA法检测各组大鼠骨髓AKT、磷酸化AKT(p-AKT)及内皮型一氧化氮合酶(endothelial nitric oxide synthase,eNOS)蛋白含量,免疫荧光共聚焦检测各组大鼠大脑皮质区CD34+微血管密度。结果脑缺血再灌注后24h和48h,大鼠骨髓和外周血CD34+EPCs数量较Sham组明显增多,EA组骨髓和外周血CD34+EPCs数量在各个观察时间点均较I/R组明显增多,I/REL组与I/RE组比较,骨髓及外周血CD34+EPCs数量无明显增高。I/R组大鼠骨髓p-AKT和eNO含量在再灌注后各时间点均较Sham组明显增多,I/RE组p-AKT及eNOS较I/R组明显增多,I/REL组与I/RE组比较,上述蛋白表达明显减少。所有组于各观察时间点总AKT蛋白表达无明显差异。此外,脑缺血再灌注后各时间点,大鼠大脑皮质缺血区CD34+MVD较Sham组明显增多。EA组CD34+微血管密度较I/R组进一步增加,I/REL组与I/RE组比较,CD34+微血管密度明显减少。结论电针可通过进一步激活骨髓PI3K/AKT信号通路动员局灶脑缺血/再灌注大鼠骨髓EPCs至外周血,促进脑血管再生。
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