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碱性果胶酶在重组毕赤酵母中高效表达的关键因素研究
作者姓名:王芸  华兆哲  刘立明  堵国成  陈坚
作者单位:江南大学工业生物技术教育部重点实验室 无锡 214122;江南大学工业生物技术教育部重点实验室 无锡 214122;江南大学工业生物技术教育部重点实验室 无锡 214122;江南大学工业生物技术教育部重点实验室 无锡 214122;(1. 江南大学工业生物技术教育部重点实验室 无锡 214122) ( 2. 江南大学食品科学技术国家重点实验室 无锡 214122)
基金项目:国家重点基础研究发展规划项目(973计划)(No. 2007CB714306); 国家杰出青年基金(No. 20625619)
摘    要:为提高重组毕赤酵母生产碱性果胶酶的产量和生产强度, 在摇瓶条件下优化了重组毕赤酵母生产碱性果胶酶的关键因素。结果表明, 以下条件:初始甘油浓度40 g/L、初始甲醇浓度3.1 g甲醇/g DCW、每24 h添加0.51 g甲醇/g DCW、诱导表达周期72 h、250 mL三角瓶诱导培养基装液量30 mL、初始pH 6.0, 最适于菌体生长与产物表达。在此基础上, 7 L罐上通过恒速流加甘油进一步提高细胞密度, 诱导阶段甲醇采取前期恒速流加和后期DO-stat, 发酵结束菌体干重达80 g/L, 酶活为217 U/mL, 比摇瓶结果提高了66.2%。

关 键 词:碱性果胶酶   重组毕赤酵母   高效表达   甲醇诱导
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