| 麻疯树核糖体失活蛋白Curcin2的原核可溶性表达及其抗真菌活性研究 |
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| 引用本文： | 邵子静,蒋楠,晏华立,詹诚,徐莺,陈放.麻疯树核糖体失活蛋白Curcin2的原核可溶性表达及其抗真菌活性研究[J].中国生物工程杂志,2013,33(7):43-49. |
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| 作者姓名： | 邵子静 蒋楠 晏华立 詹诚 徐莺 陈放 |
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| 作者单位： | 四川大学生命科学学院 生物资源与生态环境教育部重点实验室 成都 610064 |
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| 基金项目： | 国家"十二五"科技支撑项目 |
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| 摘 要： | Curcin2是麻疯树幼苗在真菌侵染、干旱及高低温胁迫下诱导产生的一种核糖体失活蛋白.采用分子克隆的方法,从麻疯树基因组中扩增到Curcin2成熟肽编码基因,分别连接到质粒载体pGEX-6p-1、pMAL-c5E上,转化大肠杆菌最终获得重组菌PGC(pGEX-6p-1-curcin2)和PMC(pMAL-c5E-curcin2).在不同温度、IPTG浓度、时间诱导下,Curcin2在重组菌PGC中均以包涵体形式表达,在重组菌PMC中主要以可溶性融合蛋白形式表达,且蛋白质的表达量与诱导条件相关.重组菌PMC表达可溶性curcin2的优化条件为:温度28℃,IPTG 0.3mmol/L,时间8h,此条件下目的蛋白占总蛋白表达量的30.6％,1L培养物中可获得19.74mg电泳纯的重组蛋白.重组蛋白可被MBP TrapTM HP柱亲和纯化并与curcin抗体发生抗原抗体反应.体外抗真菌活性实验表明,纯化后的curcin2融合蛋白有抑制真菌生长作用,且对小麦赤霉、油菜菌核的抑制作用强于curcin.此蛋白的获得为其相关功能的研究奠定了基础.
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| 关 键 词： | 麻疯树 核糖体失活蛋白 原核表达 抗真菌活性 |
| 收稿时间： | 2013-04-02 |
The Soluble Prokaryotic Expressed Ribosome-inactivating Protein Curcin2 with Anti-fungal Activity from Jatropha curcas L. |
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| SHAO Zi-jing,JIANG Nan,YAN Hua-li,ZHAN Cheng,XU Ying,CHEN Fang.The Soluble Prokaryotic Expressed Ribosome-inactivating Protein Curcin2 with Anti-fungal Activity from Jatropha curcas L.[J].China Biotechnology,2013,33(7):43-49. |
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| Authors: | SHAO Zi-jing JIANG Nan YAN Hua-li ZHAN Cheng XU Ying CHEN Fang |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Jatropha curcas L Ribosome-inactivating protein Prokaryotic expression Antifungal activity |
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