| 构建伴有β-葡萄糖苷酶表达的乙醇发酵大肠杆菌 |
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| 引用本文： | 张瑶,罗紫臣,高秋强,鲍杰.构建伴有β-葡萄糖苷酶表达的乙醇发酵大肠杆菌[J].生物工程学报,2013,29(9):1254-1267. |
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| 作者姓名： | 张瑶 罗紫臣 高秋强 鲍杰 |
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| 作者单位： | 华东理工大学生物工程学院 生物反应器工程国家重点实验室，上海 200237;华东理工大学生物工程学院 生物反应器工程国家重点实验室，上海 200237;华东理工大学生物工程学院 生物反应器工程国家重点实验室，上海 200237;华东理工大学生物工程学院 生物反应器工程国家重点实验室，上海 200237 |
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| 基金项目： | 国家重点基础研究发展计划 (973计划) (No. 2011CB707406)，国家高技术研究发展计划 (863计划) (No. 2012AA022301)，中国博士后基金 (No. 2012M520850)，中央高校基本科研业务费专项资金 (Nos. WF0913005, WF1314036) 资助。 |
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| 摘 要： | 研究构建能够分泌表达纤维素酶的产乙醇菌株，实现降解木质纤维素生产乙醇的整合生物加工过程。文中通过克隆来自运动发酵单胞菌Zymomonas mobilis ZM4的丙酮酸脱羧酶基因pdc和乙醇脱氢酶基因adhB，并通过Red重组将二者整合到大肠杆菌Escherichia coli JM109基因组中，首先构建了一株可以利用葡萄糖进行乙醇发酵的重组菌E. coli P81。随后将来源于多粘芽胞杆菌Bacillus polymyxa1.794的β-葡萄糖苷酶基因bglB在E. coli P81中进行了分泌表达，得到了一株可以进行纤维二糖降解和乙醇发酵双重功能的重组菌E. coli P81(pUC19-bglB)。该菌胞外分泌β-糖苷酶活达到84.78 mU/mL菌液，纤维二糖酶活达到了32.32 mU/mL菌液。该重组菌E. coli P81(pUC19-bglB) 以纤维二糖为碳源进行乙醇发酵，乙醇得率达到了理论产率55.8％，而在葡萄糖和纤维二糖的共发酵中，其乙醇产量达到了理论产率46.5％。构建得到的此株整合生物加工大肠杆菌能够利用β-葡萄糖苷酶生产乙醇，为构建能利用木质纤维素分解产物生产燃料乙醇的高效、稳定生产用工程菌奠定了良好的基础。
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| 关 键 词： | 大肠杆菌，乙醇发酵，β-葡萄糖苷酶，分泌表达，整合生物加工 |
| 收稿时间： | 2013/3/16 0:00:00 |
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