蛋白质突变库高通量表达筛选方法的研究 |
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引用本文: | 黄治中,Nancy Wakeham,段红英,张来幸,黄博,张凯.蛋白质突变库高通量表达筛选方法的研究[J].生物物理学报,2012(12):998-1006. |
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作者姓名: | 黄治中 Nancy Wakeham 段红英 张来幸 黄博 张凯 |
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作者单位: | 中国科学院生物物理研究所;Oklahoma Medical Research Foundation |
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基金项目: | “973”计划项目(2009CB918803) |
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摘 要: | 人工进化方法被越来越多地应用于重组蛋白的表达筛选及其结构功能的研究,在适当的选择压力下,它可以有效地改善野生型蛋白固有的低表达和低稳定性等问题。本研究就如何进行快速、有效的蛋白质人工进化以提高重组蛋白表达量,进行了方法学探索,通过建立以绿色荧光蛋白为报告基因、结合流式细胞仪分选和96孔板等高通量筛选方法,成功地进行了一例高通量蛋白质点突变库重组表达株的筛选。
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关 键 词: | Gateway克隆 绿色荧光蛋白 流式细胞术 高通量筛选 重组蛋白表达 |
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