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| 层析法去除重组人血清白蛋白干扰素α2b融合蛋白的内毒素 | |
| 作者姓名： | 徐向荣 马国昌 王昌梅 单剑峰 沈玲 黄岩山 周金宝 |
| 摘 要： | 用柱层析方法在生产重组人血清白蛋白干扰素α2b融合蛋白过程中去除产品中的内毒素.所用柱层析组合为Blue-sepharose亲和柱层析、SOURCE 15 ISO疏水柱层析、Q Sepharose F.F.离子交换柱层析、Sephadex G25 Coarse凝胶过滤柱.采用鲎试剂法检测柱层析各阶段得到蛋白中的内毒素含量;并用RP-HPLC方法测定柱层析各阶段得到蛋白的纯度与浓度,求出每毫克蛋白的内毒素含量.结果为每步柱层析过程式均有去除内毒素的作用,最终所得蛋白的内毒素含量降为1 EU/mg,去除率达到99.9%.因而生产重组人血清白蛋白干扰素α2b融合蛋白所用分离纯化柱层析技术在纯化蛋白的同时能有效的去除产品中内毒素,所得产品内毒素的含量远低于药典对注射剂的内毒素含量要求. |
| 关 键 词： | 人血清白蛋白 干扰素α2b 柱层析 内毒素 层析法 重组人血清白蛋白 干扰素 融合蛋白 去除内毒素 Endotoxin Removing 注射剂 药典 毒素含量 纯化蛋白 柱层析技术 分离纯化 去除率 作用 过程式 结果 浓度 测定 方法 |
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