Mip1对大鼠心肌细胞凋亡基因Bid转录调控作用的初探 |
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引用本文: | 刘小柳,邓恭华,雷坚,蒋磊,王海云.Mip1对大鼠心肌细胞凋亡基因Bid转录调控作用的初探[J].现代生物医学进展,2009,9(7). |
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作者姓名: | 刘小柳 邓恭华 雷坚 蒋磊 王海云 |
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作者单位: | 中南大学湘雅医学院病理生理学系,湖南,长沙,410078 |
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基金项目: | 国家重点基础研究发展规划(973计划) |
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摘 要: | 目的:研究转录因子Mip1对大鼠心肌细胞H9C2凋亡相关基因Bid的转录调控作用.方法:以H9C2细胞基因组DNA为模板,扩增Bid核心启动子片段,将其克隆入荧光素酶报告基因质粒PGL3-Basic中,构建重组载体,并采用双酶切法、PCR法及基因测序对其进行鉴定.用脂质体转染法将该载体转入Mip1不同程度过表达的H9C2细胞,检测该细胞Bid基因启动子区的转录活性.结果:成功克隆Bid基因启动子区,双酶切、PCR和基因测序均显示PGL3-Basic-Bid promoter重组载体构建成功.荧光素酶相对活性检测显示在H9C2细胞中,随着Mip1转入的增多,Bid启动子区转录活性逐渐下降.结论:Mip1作为一个新的转录抑制因子,可以下调凋亡基因Bid的转录.
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关 键 词: | Mip1 转录调控 Bid 荧光素酶报告基因 |
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