产GL-7-ACA酰化酶重组大肠杆菌的构建和表达* |
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引用本文: | 罗晖, 胡晓佳, 周航, 童忆舟, 于慧敏, 李强, 沈忠耀,.产GL-7-ACA酰化酶重组大肠杆菌的构建和表达*[J].微生物学通报,2004,31(4). |
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作者姓名: | 罗晖 胡晓佳 周航 童忆舟 于慧敏 李强 沈忠耀 |
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作者单位: | 清华大学化工系生物化学研究所 北京; |
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摘 要: | 为了实现GL-7-ACA酰化酶在大肠杆菌中的成功表达 ,将GL-7-ACA酰化酶基因用PCR的方法去除其信号肽序列 ,并将其连接到质粒pET-28a ,通过筛选得到了表达GL-7-ACA酰化酶的重组菌BL21 (DE3) /pET ACY。分别考察了诱导温度、菌浓 (OD600)、诱导剂IPTG的用量等因素对重组菌表达GL-7-ACA酰化酶的影响。在优化条件下 ,GL-7-ACA酰化酶酶活可达 266U/L。GL-7-ACA酰化酶经一步DEAE Sepharose纯化即
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关 键 词: | GL-7-ACA酰化酶 大肠杆菌 表达 |
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