N-氨甲酰基-D-氨基酸酰胺水解酶的快速纯化及性质 |
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作者姓名: | 袁静明石亚伟 杨秀清连惠勇 齐延红 |
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作者单位: | 山西大学生物工程中心 太原030006
(袁静明,石亚伟,杨秀清),山西省生物研究所 太原030006
(连惠勇),山西省生物研究所 太原030006(齐延红) |
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基金项目: | 山西省重点行业科技发展项目 ( 9832 2 5 ) |
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摘 要: | 通过硫酸铵分级沉淀、疏水层析及阴离子交换层析等三步 ,有效地从一菌株NO .2 2 6 2中纯化了N 氨甲酰基 D 氨基酸酰胺水解酶。结果表明 ,酶活性回收约 2 0 %,纯化了 8 4倍。天然PAGE与SDS PAGE分析表明 ,该酶分子为同源四聚体 ,单体分子量约为 3 5kD。酶催化反应的最适pH为 7 7~ 8 0 ,最适温度为 45℃。以N 氨甲酰 DL 丙氨酸为底物时 ,Km =1 3×1 0 - 3 mol L ,Vmax=0 .3 3mol min。二价金属离子Ni2 + 有激活作用 ,Zn2 + 有明显的抑制作用 ,而Co2 + 对酶活无影响。该酶N 末端 8个氨基酸残基依次为TRQKILAF。
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关 键 词: | 菌株NO.2262 N-氨甲酰基-D-氨基酸酰胺水解酶 纯化 性质 D-氨基酸 |
文章编号: | 0001-6209(2002)01-0088-05 |
修稿时间: | 2001-03-02 |
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