| 酵母双杂交检测C17orf25蛋白与ADP-核糖焦磷酸水解酶NUDT9的相互作用 |
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| 引用本文： | 张惠堂,颜志强,胡小波,杨胜利,龚毅. 酵母双杂交检测C17orf25蛋白与ADP-核糖焦磷酸水解酶NUDT9的相互作用[J]. Acta biochimica et biophysica Sinica, 2003, 35(8): 747-751 |
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| 作者姓名： | 张惠堂 颜志强 胡小波 杨胜利 龚毅 |
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| 作者单位： | 中国科学院上海生命科学研究院生物工程研究中心 上海200233(张惠堂，颜志强，胡小波，杨胜利)，中国科学院上海生命科学研究院生物工程研究中心 上海200233(龚毅) |
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| 基金项目： | 国家科技攻关计划资助项目(No .2 0 0 2BA711A0 2 1)~~ |
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| 摘 要： | 通过RACEPCR的方法从肝组织中分离得到C17orf2 5基因。利用酵母双杂交的方法以C17orf2 5为结合结构域筛选人HeLacDNA文库分离得到nudt9基因。NUDT9是一种焦磷酸酶 ,可以将ADP 核糖水解成AMP和核糖 5 磷酸。在大肠杆菌中直接表达了C17orf2 5蛋白、6×His tag与NUDT9的融合蛋白质 ,两者均以包涵体形式存在。蛋白质条带割胶纯化 ,并复性。之后的NTA Ni2 亲和柱层析实验表明这两种蛋白质在体外相互作用。将C17orf2 5与绿色荧光蛋白基因在SMMC772 1中融合表达 ,结果表明C17orf2 5蛋白可能定位在线粒体中 ,侧面印证了在细胞内与NUDT9作用的空间可能性。ADP 核糖在体内具有重要的生理作用 ,在细胞内的累积对细胞生长不利 ;同时 ,ADP 核糖化是一种重要的蛋白质修饰方式 ,与多种细胞凋亡的发生有关。因此从实验结果可以判断 ,C17orf2 5对细胞生长的抑制作用可能通过与NUDT9的相互作用来实现
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| 关 键 词： | C17orf25 NUDT9 酵母双杂交 线粒体 ADP-核糖 |
Interaction of C17orf25 with ADP-ribose Pyrophosphatase NUDT9 Detected via Yeast Two-hybrid Method |
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| ZHANG Hui Tang,YAN Zhi Qiang,HU Xiao Bo,YANG Sheng Li,GONG Yi. Interaction of C17orf25 with ADP-ribose Pyrophosphatase NUDT9 Detected via Yeast Two-hybrid Method[J]. Acta biochimica et biophysica Sinica, 2003, 35(8): 747-751 |
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| Authors: | ZHANG Hui Tang YAN Zhi Qiang HU Xiao Bo YANG Sheng Li GONG Yi |
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| Affiliation: | ZHANG Hui Tang,YAN Zhi Qiang,HU Xiao Bo,YANG Sheng Li,GONG Yi * |
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| Abstract: | The gene C 17 orf 25 was isolated from the liver by RACE PCR. nudt 9 gene was screened by yeast two hybrid method in MatchMaker human HeLa cDNA library. NUDT9 is an enzyme that has pyrophosphatase activity with ADP ribose as its substrate. Fusion expression of C17orf25 and GFP and computer analysis showed that C17orf25 was probably located in mitochondria. Furthermore, C17orf25 may suppress the cell growth by interaction with NUDT9. |
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| Keywords: | C17orf25 NUDT9 yeast two hybrid mitochondria ADP ribose |
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