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| 含FLP“交换盒”结构的打靶载体构建及ES细胞打靶研究 | |
| 作者姓名： | 郑敬民 李坚 傅继梁 |
| 作者单位： | 第二军医大学医学遗传学教研室, |
| 基金项目： | 国家自然科学基金重点项目(39830363). |
| 摘 要： | 利用小鼠HPRT基因组DNA片段和人工合成的含有FLP重组酶识别位点变异体FRT和F3RT序列的寡核苷酸 ,构建了针对小鼠HPRT基因位点的置换型打靶载体pSP HPRT Fneo F3。经过限制酶酶切及部分测序鉴定其结构正确后 ,将线性化了的打靶载体以电穿孔法导入ES细胞内 ,经G418和 6 -TG双药筛选和分子鉴定 ,得到了 2个在HPRT位点整合有FLP重组酶“交换盒”F Neo F3结构的双交换重组ES细胞克隆 ,为建立基于FLP重组酶介导的盒式交换的高效、定点转基因体系创造了条件. |
| 关 键 词： | 基因打靶 胚胎干细胞 HPRT FLP重组酶 |
| 文章编号： | 1000-3061(2001)05-0566-04 |
| 修稿时间： | 2001-04-06 |
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