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鹅副黏病毒环介导等温扩增快速检测方法的建立及应用
引用本文:鲜思美,韦洪才,尹强军,孔维祥,苏刚.鹅副黏病毒环介导等温扩增快速检测方法的建立及应用[J].生物技术通报,2012,0(11):150-154.
作者姓名:鲜思美  韦洪才  尹强军  孔维祥  苏刚
作者单位:1. 贵州大学动物科学学院,贵阳550025;贵州省动物疫病研究所,贵阳550025
2. 贵州大学动物科学学院,贵阳,550025
基金项目:贵州大学大学生创新性实验计划项目
摘    要:参照GenBank中登录的鹅副黏病毒(gallinacean paramyxovirus,GPMV)序列(AY325797),针对GPMV的F基因保守区域设计了4条引物,通过优化反应条件,建立了检测GPMV的逆转录环介导等温扩增技术(RT-LAMP),并进行了特异性试验、敏感性试验及临床样本检测.结果显示,建立的RT-LAMP方法对GPMV阳性样品扩增产物的电泳呈特征性梯状条带,而鸭瘟病毒(DPV)、鹅细小病毒(GPV)、番鸭细小病毒(MDPV)、鸭肝炎病毒(DHV)、鸭疫里默氏杆菌(Riemerella anatipestifer)、鸭源沙门氏菌(Salmonella anatamu)、鸡马立克病毒(MDV)、鸡传染性支气管炎病毒(IBV)的扩增产物电泳后均无扩增条带.建立的RT-LAMP方法对GPMV的最低检出量为9.5 fg的cDNA模板,敏感性比常规RT-PCR方法高1 000倍.表明建立的RT-LAMP方法特异性强、敏感性高.对6份临床样本的检出率为100% (6/6),与常规RT-PCR的符合率为100%.

关 键 词:鹅副黏病毒  逆转录环介导等温扩增技术  检测

Establishmen and Application of a Loop-mediated Isothermal Amplification Method for Rapid Detection of Gallinacean Paramyxovirus
Xian Simei , Wei Hongcai , Yin Qiangjun , Kong Weixiang , Su Gang.Establishmen and Application of a Loop-mediated Isothermal Amplification Method for Rapid Detection of Gallinacean Paramyxovirus[J].Biotechnology Bulletin,2012,0(11):150-154.
Authors:Xian Simei  Wei Hongcai  Yin Qiangjun  Kong Weixiang  Su Gang
Abstract:
Keywords:
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