| DNA错配修复基因mutS的高效表达及表达产物活性鉴定 |
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| 引用本文： | 毕利军 周亚凤 邓教宇 张先恩 张成刚 Anthony E. G. Cass.DNA错配修复基因mutS的高效表达及表达产物活性鉴定[J].生物工程学报,2002,18(5). |
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| 作者姓名： | 毕利军 周亚凤 邓教宇 张先恩 张成刚 Anthony E. G. Cass |
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| 作者单位： | 1.中国科学院武汉病毒所，武汉 430071；2.中国科学院沈阳应用生态研究所，沈阳 110015；3.Biochemistry Department, Imperial College of Science, Tehchnology & Medicine, London,SW72AY，UK |
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| 摘 要： | 将DNA错配修复基因mutS（2.56kb）克隆于分泌型原核表达载体pET32a（+）上，以N端融合6个组氨酸的形式在E.coliAD494(DE3) 中进行了IPTG诱导表达。SDSPAGE分析证实有一与预期分子量相应的诱导表达条带，其表达量占全菌蛋白质的35％左右，且表达蛋白以可溶形式存在。利用固定化金属离子（Ni2+）配体亲和层析柱纯化目的蛋白，其纯度为90％以上。与含有错配碱基DNA双链的结合反应证明该蛋白具有特异性识别、结合含有错配碱基DNA双链的生物活性。
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| 关 键 词： | 错配修复基因mutS，表达，纯化，鉴定 |
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