| SARS冠状病毒囊膜E蛋白的重组表达与单克隆抗体制备 |
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| 引用本文： | 王平,黄庆生,丁天兵,任君萍,宋建华,徐志凯.SARS冠状病毒囊膜E蛋白的重组表达与单克隆抗体制备[J].生物技术通讯,2005,16(5):485-487. |
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| 作者姓名： | 王平 黄庆生 丁天兵 任君萍 宋建华 徐志凯 |
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| 作者单位： | 第四军医大学,微生物教研室,陕西,西安,710032 |
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| 基金项目： | 第四军医大学应急启动专项基金项目（2003ZX01） |
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| 摘 要： | 从基因库中调取SARS冠状病毒囊膜E蛋白基因序列，用连接PCR方法合成完整片段。测序确认后与人免疫球蛋白（IgG）序列Fc段连接并克隆至原核表达载体pPRO EX Hta中。从SDS—PAGE凝胶中回收表达产物后免疫BALB／c小鼠，经融合、筛选制备特异性单克隆抗体（mAb）。连接PCR扩增出231bp的DNA，测序结果与GenBank公布的序列一致，与人IgG序列Fc段基因连接后克隆至原核表达载体，在大肠杆菌中获得较好表达。表达产物经SDS—PAGE后，在相对分子质量（Mr）约37000处可见1条明显的诱导表达条带。Western印迹的结果表明，该电泳带与SARS患者的恢复期血清呈特异性免疫反应，，从SDS—PAGE凝胶中回收表达产物并免疫BALB／c小鼠，制备出2株抗E蛋白的mAb。这些mAb与SDS—PAGE凝胶上Mr约为37000的蛋白带也呈现很强的免疫反应。所获得的重组表达E蛋白及特异性mAb为进一步建立SARS病毒感染早期诊断的方法奠定了基础。
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| 关 键 词： | SARS冠状病毒 囊膜蛋白 原核表达 单克隆抗体 |
| 文章编号： | 1009-0002(2005)05-0485-03 |
| 收稿时间： | 03 24 2005 12:00AM |
| 修稿时间： | 2005年3月24日 |
Recombination and Expression of SARS Coronavirus Envelop Protein and Generation of Specific Monoclonal Antibody |
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| WANG Ping,HUANG Qing-sheng,DING Tian-bing,REN Jun-ping,SONG Jian-hua,XU Zhi-kai.Recombination and Expression of SARS Coronavirus Envelop Protein and Generation of Specific Monoclonal Antibody[J].Letters in Biotechnology,2005,16(5):485-487. |
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| Authors: | WANG Ping HUANG Qing-sheng DING Tian-bing REN Jun-ping SONG Jian-hua XU Zhi-kai |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | SARS eoronavirus envelop protein prokaryotic expression monoclonal antibody |
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