| 不同固定液对体外细胞系荧光蛋白淬灭及对胞内蛋白荧光染色的影响 |
| |
| 引用本文： | 林国豪,蒋 旭,孙丽纳,王 昊,姚 茜,韦正波,谢 莹.不同固定液对体外细胞系荧光蛋白淬灭及对胞内蛋白荧光染色的影响[J].现代生物医学进展,2019,19(11):2072-2075. |
| |
| 作者姓名： | 林国豪 蒋 旭 孙丽纳 王 昊 姚 茜 韦正波 谢 莹 |
| |
| 作者单位： | 广西医科大学生命科学研究院;区域性高发肿瘤早期防治研究教育部重点实验室;广西医科大学研究生学院;广西医科大学附属肿瘤医院头颈外科 |
| |
| 基金项目： | 国家自然科学基金项目（81760361）；广西壮族自治区自然科学基金项目（2017GXNSFAA198064，2016GXNSFAA380096） |
| |
| 摘 要： | 目的:比较不同细胞固定液对荧光蛋白淬灭情况以及核内、胞浆蛋白免疫荧光染色的影响。方法:分别对融合了RFP和GFP基因的鼻咽癌HK1细胞采用95%乙醇、75%乙醇、甲醇、丙酮:甲醇=1:1、5%冰乙酸、Carnoy固定液进行固定,然后采用免疫荧光法对细胞进行免疫染色。结果:六种固定液均能使荧光蛋白猝灭。免疫荧光染色方面,对于核蛋白染色,75%乙醇、95%乙醇、丙酮:甲醇=1:1、Carnoy固定液固定后核区获得明显的荧光染色,而采用甲醇、5%冰乙酸固定后荧光染色不明显。对于胞质蛋白染色,按荧光染色的清晰程度分为固定于Carnoy固定液丙酮:甲醇=1:1甲醇5%冰乙酸75%乙醇95%乙醇,前四者固定可见分布于胞质,75%乙醇或95%乙醇固定的目标蛋白定位不清。结论:六种不同的固定液在有效失活荧光蛋白的情况下对核蛋白及胞浆蛋白抗原性的影响略有不同,可根据研究目的蛋白表达的部位及特点来选用合适的固定液。
|
| 关 键 词： | 荧光蛋白 猝灭 免疫荧光 固定方法 |
| 收稿时间： | 2019/1/8 0:00:00 |
| 修稿时间： | 2019/1/30 0:00:00 |
Effects of Different Fixatives on the Quenching of Fluorescent Proteins in Vitro Cell Lines and Intracellular Protein Fluorescence Staining |
| |
| LIN Guo-hao,JIANG Xu,SUN Li-n,WANG Hao,YAO Xi,WEI Zheng-bo,XIE Ying.Effects of Different Fixatives on the Quenching of Fluorescent Proteins in Vitro Cell Lines and Intracellular Protein Fluorescence Staining[J].Progress in Modern Biomedicine,2019,19(11):2072-2075. |
| |
| Authors: | LIN Guo-hao JIANG Xu SUN Li-n WANG Hao YAO Xi WEI Zheng-bo XIE Ying |
| |
| Institution: | 1 Life Science Institute, Guangxi Medical University, Nanning, Guangxi, 530021, China; 2 Key Laboratory for Early Prevention and Treatment of Endemic Tumors, Ministry of Education, Nanning, Guangxi, 530021, China; 3 Graduate School of Guangxi Medical University, Nanning, Guangxi, 530021, China;1 Life Science Institute, Guangxi Medical University, Nanning, Guangxi, 530021, China; 2 Key Laboratory for Early Prevention and Treatment of Endemic Tumors, Ministry of Education, Nanning, Guangxi, 530021, China; 3 Graduate School of Guangxi Medical University, Nanning, Guangxi, 530021, China; 4 Department of Head and Neck Surgery, Affiliated Tumor Hospital of Guangxi Medical University, Nanning, Guangxi, 530021, China |
| |
| Abstract: | |
| |
| Keywords: | Fluorescent protein Quenching Immunofluorescence Fixation method |
| 本文献已被 CNKI 等数据库收录！ |
| 点击此处可从《现代生物医学进展》浏览原始摘要信息 |
| 点击此处可从《现代生物医学进展》下载免费的PDF全文 |
|
