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申克孢子丝菌酵母相和菌丝相cDNA消减文库的构建
作者姓名:周汛  杨致邦  郭丽媛  肖异珠
作者单位:[1]重庆医科大学附属第一医院皮肤科,重庆市400016 [2]重庆医科大学基础医学实验教学中心病原生物学与免疫学实验室,重庆市400016 [3]重庆医科大学附属儿童医院皮肤科,重庆市400014
基金项目:重庆市卫生局科学基金(No.2008-2-73)
摘    要:目的 筛选与申克孢子丝菌酵母相与菌丝相双相转换相关的差异表达基因,为探讨其双相转换的分子的机制奠定基础.方法 应用抑制性消减杂交技术,构建高特异性的申克孢子丝菌菌丝相(mycelium,M)和酵母相(yeast,Y)的正反cDNA消减文库,并对其差异表达的基因进行生物信息学分析.结果 M+Y文库获得751条表达序列标签,平均长度为690.98 bp,经拼接后获得101条非冗余序列.Y+M文库获得875条表达序列标签,平均长度为575.9 bp,拼接获得249条非冗余序列.经BLASTN比对,这些差异表达基因中,某些结构基因和功能不明的细胞分子类基因可能与双相转换有关.结论 成功构建了高特异性的申克孢子丝菌菌丝相和酵母相的正反cDNA 消减文库,为进一步筛选申克孢子丝菌的双相转换基因奠定了基础.

关 键 词:申克孢子丝菌  抑制性消减杂交  cDNA  消减文库
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