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| 复合干扰素突变体在毕赤酵母中的表达、纯化及活性分析 | |
| 作者姓名： | 于长明 付玲 齐连权 张晓鹏 于婷 来大志 王海涛 陈薇 |
| 作者单位： | 北京微生物流行病研究所,北京,100071 |
| 摘 要： | 根据毕赤酵母密码子偏性合成了复合干扰素突变体基因 ,克隆至分泌型酵母表达载体pMEX9K ,将重组载体pMEX CIFNm用SacⅠ线性化后 ,转化毕赤酵母GS115 .转化子经诱导后 ,培养上清有抗病毒活性的蛋白产生 .经过离子交换 ,疏水层析 ,凝胶过滤三步层析纯化 ,得到了纯度大于95 %的重组复合干扰素突变体 ,经N端氨基酸序列分析表明 ,该蛋白N端序列与理论值一致 ,质谱测定分子量为 19 3kD ,与理论值一致 .用细胞病变抑制法测定其活性 ,并结合Lowry法蛋白定量计算其比活性为 6× 10 8IU mg ,与复合干扰素的比活相当 . |
| 关 键 词： | 复合干扰素突变体 毕赤酵母 基因表达 |
| 收稿时间： | 2003-06-20 |
| 修稿时间： | 2002-07-25 |
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