| 嗜热四膜虫两类不同金属硫蛋白的功能补偿分析简 |
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| 引用本文： | 卢剑功,许静,张鹏幸,王伟.嗜热四膜虫两类不同金属硫蛋白的功能补偿分析简[J].水生生物学报,2014,38(2):249-256. |
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| 作者姓名： | 卢剑功 许静 张鹏幸 王伟 |
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| 作者单位： | 山西大学生物技术研究所, 化学生物学与分子工程教育部重点实验室, 太原 030006 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金（30770295，31072000）；教育部科学技术研究重点项目（No. 201026）资助 |
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| 摘 要： | 为了分析嗜热四膜虫两类金属硫蛋白之间的关系,研究分别构建了MTT1-MTT3和MTT2-MTT4的基因敲除载体,通过同源重组获得敲除大核MTT1-MTT3和MTT2-MTT4的两种嗜热四膜虫突变体细胞株△MTT1-MTT3和△MTT2-MTT4。两种突变体细胞株暴露在Cd2+、Cu2+和H2O2的生长表现出显著不同,△MTT1-MTT3突变体细胞对Cd2+的耐受性显著下降,而△MTT2-MTT4突变体细胞对Cu2+和H2O2的耐受性均显著下降。实时荧光定量PCR分析不同突变体中其他MTT基因的表达变化,在△MTT2-MTT4突变体细胞株中,MTT5的表达水平下调,在500μmol/L Cu2+处理后,△MTT2-MTT4突变体细胞中MTT1、MTT3和MTT5表达相对野生型分别上调6.1、9.5和8.5倍。在△MTT1-MTT3突变体细胞中,MTT2、MTT4和MTT5的表达水平下调,当5μmol/L Cd2+处理后,△MTT1-MTT3突变体细胞株MTT5表达水平相对野生型上调2.9倍,而MTT2和MTT4表达水平相对野生型分别下降了4.9倍和2.5倍。结果表明嗜热四膜虫中的金属硫蛋白MTT1、MTT3和MTT5主要参与细胞的重金属解毒功能;而MTT2和MTT4主要参与细胞内正常的新陈代谢功能,不同的金属硫蛋白基因之间的表达存在相互调控和功能补偿。
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| 关 键 词： | 嗜热四膜虫 金属硫蛋白 基因敲除 实时荧光定量PCR |
| 收稿时间： | 2013-01-25 |
ANALYSIS OF FUNCTIONAL COMPENSATION OF TWO DIFFERENT METALLOTHIONEIN SUBFAMILIES FROM TETRAHYMENA THERMOPHILA |
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| LU Jian-Gong,XU Jing,ZHANG Peng-Xing,WANG Wei.ANALYSIS OF FUNCTIONAL COMPENSATION OF TWO DIFFERENT METALLOTHIONEIN SUBFAMILIES FROM TETRAHYMENA THERMOPHILA[J].Acta Hydrobiologica Sinica,2014,38(2):249-256. |
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| Authors: | LU Jian-Gong XU Jing ZHANG Peng-Xing WANG Wei |
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| Institution: | Key Laboratory of Chemical Biology and Molecular Engineering of Ministry of Education, Institute of Biotechnology, Shanxi University, Taiyuan 030006, China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Tetrahymena thermophila Metallothioneins Gene knockout RT-PCR |
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