| 抗伏马菌素单链抗体与碱性磷酸酶的融合表达及活性鉴定 |
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| 引用本文： | 刘江丽,赵雪,尚国富,于欢,彭晓燕,王赟,周静,刘丽娜,曾柱,胡祖权.抗伏马菌素单链抗体与碱性磷酸酶的融合表达及活性鉴定[J].基因组学与应用生物学,2021,40(1):252-257. |
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| 作者姓名： | 刘江丽 赵雪 尚国富 于欢 彭晓燕 王赟 周静 刘丽娜 曾柱 胡祖权 |
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| 作者单位： | 贵州医科大学,贵州省免疫细胞与抗体工程研究中心,生物与医学工程重点实验室,贵阳,550025;贵州医科大学生物与工程学院,贵阳,550025;贵州医科大学,贵州省免疫细胞与抗体工程研究中心,生物与医学工程重点实验室,贵阳,550025;贵州医科大学基础医学院,贵阳,550025;贵州医科大学,环境污染与疾病监控省部共建教育部重点实验室,贵阳,550025;贵州医科大学生物与工程学院,贵阳,550025;贵州医科大学,贵州省免疫细胞与抗体工程研究中心,生物与医学工程重点实验室,贵阳,550025;贵州医科大学,环境污染与疾病监控省部共建教育部重点实验室,贵阳,550025;贵州医科大学生物与工程学院,贵阳,550025;贵州医科大学基础医学院,贵阳,550025;贵州医科大学,贵州省免疫细胞与抗体工程研究中心,生物与医学工程重点实验室,贵阳,550025;贵州医科大学,环境污染与疾病监控省部共建教育部重点实验室,贵阳,550025;贵州医科大学生物与工程学院,贵阳,550025 |
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| 摘 要： | 为原核表达抗伏马菌素单链抗体-碱性磷酸酶融合蛋白并分析其活性,本研究根据抗伏马菌素单链抗体H2的基因序列设计引物,PCR扩增获得目的基因,经限制性核酸内切酶SfiⅠ和Not Ⅰ的酶切位点克隆到pDAP2/S载体中,转化大肠杆菌(Eschrichia coli)菌株XL1-Blue并鉴定阳性转化子.IPTG诱导H2-AP融合蛋白基因的表达,利用Western blot检测其表达情况,AP显色反应和ELISA鉴定其活性.结果显示成功构建了 pDAP2/S-H2原核表达载体,融合蛋白在大肠杆菌中实现可溶性表达,并保留单链抗体和碱性磷酸酶的活性.因此,H2-AP融合蛋白通过原核表达后可用于发展伏马菌素的快速免疫检测方法.
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| 关 键 词： | 伏马菌素 单链抗体 碱性磷酸酶 融合表达 |
Expression and Activity Identification of Fusion Protein Containing Alkaline Phosphatase and scFv Antibody Specific to Fumonisin Mycotoxin |
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| Liu Jiangli,Zhao Xue,Shang Guofu,Yu Huan,Peng Xiaoyan,Wang Yun,Zhou Jing,Liu Lina,Zeng Zhu,Hu Zuquan.Expression and Activity Identification of Fusion Protein Containing Alkaline Phosphatase and scFv Antibody Specific to Fumonisin Mycotoxin[J].Genomics and Applied Biology,2021,40(1):252-257. |
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| Authors: | Liu Jiangli Zhao Xue Shang Guofu Yu Huan Peng Xiaoyan Wang Yun Zhou Jing Liu Lina Zeng Zhu Hu Zuquan |
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